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AP12L034/AP12L036-PikoOrange蛋白定量試劑盒
  • AP12L034/AP12L036-PikoOrange蛋白定量試劑盒
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貨物所在地:上海上海市

地: 上海

更新時(shí)間:2025-01-17 18:41:39

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PikoOrange Protein Quantitation Kit是一個(gè)高度敏感的基于熒光技術(shù)定量純化蛋白質(zhì)的試劑盒,其檢測(cè)蛋白濃度范圍為0.1-15 ug/ml。比起傳統(tǒng)定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析,PikoOrange蛋白定量試劑盒敏感性更佳,此外,與NanoOrange蛋白質(zhì)定量測(cè)定技術(shù)相比具有更好的線性和重現(xiàn)性。
PikoOrange 蛋白定量試劑盒

產(chǎn)品描述
  PikoOrange Protein Quantitation Kit是一個(gè)高度敏感的基于熒光技術(shù)定量純化蛋白質(zhì)的試劑盒其檢測(cè)蛋白濃度范圍為0.1~10 μg/ml。比起傳統(tǒng)定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析,PikoOrange蛋白定量試劑盒敏感性更佳,此外,與NanoOrange蛋白質(zhì)定量測(cè)定技術(shù)相比具有更好的的線性和重現(xiàn)性。PikoOrange蛋白定量試劑盒可顯示不同蛋白質(zhì)之間的小變異性,且熒光信號(hào)穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)16 h;其受測(cè)樣本不論為純化蛋白或抗體皆適用。需特別注意的是,PikoOrange對(duì)鹽類、緩沖液、去垢劑或是其他化學(xué)物質(zhì)都有不同程度的耐受性(表1)。
產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱貨號(hào)規(guī)格價(jià)格
PikoOrange 蛋白定量試劑盒AP12L034100 assays180
PikoOrange 蛋白定量試劑盒AP12L0361000 assays1500

產(chǎn)品組分

組分AP12L034AP12L036
A: PikoOrange buffer, 10X (contains 2mM sodium azide)2.5 mL25mL
B: PikoOrange dye, 500X in DMSO125 μL1.25 mL
C: Bovine serum albumin (BSA) standard, 2mg/mL (contains 2 mM sodium azide)40 μL0.4 mL

運(yùn)輸與保存
常溫運(yùn)輸。組分A常溫保存;組分B常溫避光保存;組分C  4℃ 保存。有效期36個(gè)月。
【注】:如果緩沖液出現(xiàn)沉淀,可加熱到37℃并漩渦溶解。

使用方法

  1. 制備1x PikoOrange緩沖液: 1:10 稀釋10x緩沖液在dH2O。例如,添加1 mL10x 緩沖液至9 mL dH2O PikoOrange緩沖液可以儲(chǔ)存在室溫下。

  2. 使用前準(zhǔn)備PikoOrange工作液:將200xPikoOrange染料按1:200用1x PikoOrange緩沖液稀釋。例如,添加25 μL 500x PikoOrange染料5 mL 1x PikoOrange緩沖液。
    注意:您將需要大約3 mL工作液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(見(jiàn)表2)以及每孔檢測(cè)樣品250 μL工作液。

  3. 準(zhǔn)備未知樣本:10 μL 樣本添加 250 μL PikoOrange工作液。
    注意:您可能需要稀釋未知樣本得到不同濃度的樣本。樣品稀釋可能會(huì)減少干擾物質(zhì)的影響。

  4. 準(zhǔn)備一個(gè)蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線所需的BSA濃度,如表2所示。

  5. 樣本和標(biāo)準(zhǔn)蛋白加熱至90~ 95℃ 10分鐘,此過(guò)程需避光操作。

  6. 取出樣本室溫避光放置20 min冷卻。短時(shí)間離心收集全部樣本。

  7. 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品或未知樣品取200 μL轉(zhuǎn)移到96孔酶標(biāo)板,熒光酶標(biāo)儀讀數(shù)。激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為480/598 nm。
    【注】:樣品可以被轉(zhuǎn)移到熒光試管使用熒光儀測(cè)量。如果需要超過(guò)200 μL體積測(cè)量,等比例放大配置方案。

    1PikoOrange對(duì)不同化學(xué)物質(zhì)的耐受性

化合物承受濃度峰值
SDS0.01%
Triton X-100Below 0.001%
Tween 20Below 0.001%
CHAPSBelow 0.001%
Sodium deoxycholate (DOC)Below 0.001%
Urea10 mM
DTT100 mM
beta-ME0.1%
Ammonium sulfate1 mM
Sodium azide2 mM
Imidazole50 mM
DNA10ug/mL
EDTA1mM
Sucrose10 mM (0.34%)
Glycerol1%
PBS0.02X
NaCl1 mM
CaCl20.01 mM
MgCl20.2 mM

2準(zhǔn)備BSA樣品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線

BSA體積工作液體積BSA 終濃度(μg/mL
A5 μL BSA std (2 mg/mL)995 μL10
B250 μL solution A250 μL5
C250 μL solution B250 μL2.5
D200 μL solution C300 μL1
E250 μL solution D250 μL0.5
F250 μL solution E250 μL0.25
G100 μL solution F150 μL0.1
H0 μL solution G250 μL0


圖1:PikoOrange比NanoOrange有更好的線性和重現(xiàn)性







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