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依利特(大連)分析儀器有限公司

液相色譜柱的使用及注意事項

時間:2017-9-15 閱讀:3427
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液相色譜柱的使用:
液相色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、液相色譜柱、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照液相色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是*條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。
液相色譜柱樣品的前處理:
1使用液相色譜柱溶解樣品。
2使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產生不可逆吸附的雜質。4.2.1.3使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質。
3.液相色譜柱的配制:液相色譜是樣品組分在柱填料與液相色譜柱之間質量交換而達到分離的目的,因此要求液相色譜柱具備以下的特點:
4.液相色譜柱對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。4.2.2.2液相色譜柱具有一定惰性,與樣品不產生化學反應(特殊情況除外)。
5.液相色譜柱的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低液相色譜柱的黏度)。
6.液相色譜柱的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
7.液相色譜柱沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行。
在液相色譜柱配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在液相色譜柱中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止液相色譜柱中的微量氧與樣品發生作用。
8.液相色譜柱流速的選擇:因柱效是柱中液相色譜柱線性流速的函數,使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的液相色譜柱,要追求*柱效,使用*流速。對內徑為4.6mm的液相色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對于內徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。當選用*流速時,分析時間可能延長。可采用改變液相色譜柱的洗滌強度的方法以縮短分析時間(如使用反相柱時,可適當增加甲醇或乙腈的含量)。
液相色譜柱使用注意事項:
a.由于甲醇廉價,對于反相柱推薦使用甲醇體系(必須使用乙腈的場合除外)。
b.對于正相柱推薦使用沸程為30-60℃的石油醚或提純后的己烷作液相色譜柱,沒有提純的己烷不得使用。用水使用超純水(電阻率大于18兆歐),去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質,有可能影響分析結果。
c.含水液相色譜柱在實驗前配制,尤其是夏天使用緩沖溶液作為液相色譜柱不要過夜。加入*,防止細菌生長。
d.液相色譜柱要求使用0.45μm濾膜過濾,除去微粒雜質。
e.使用HPLC級溶劑配制液相色譜柱,使用合適的液相色譜柱可延長液相色譜柱的使用壽命,提高柱性能
想了解更多液相色譜柱信息歡迎客服

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