色譜分離常見問題有峰形、分離狀況、洗脫時間或性能改變。可以分兩個步驟來處理不可接受的色譜分離。首先，從色譜方面來評價存在的問題，其次，對產生問題的原因進行獨立分析。

評價色譜分離時建議使用標準品而不是樣品。每次進樣時應該做好樣品的特性和色譜性能記錄，這樣需要作比較時能夠提供歷史數據。

下面小編為大家帶來導致色譜分離改變的常見原因及應采取的解決方法：

1.系統不平衡

使色譜柱和檢測器有足夠的平衡時間。如果進行梯度分析，兩次分析之間，平衡時間要充足。

*次使用離子對試劑，要保證用充足的時間和充足的流動相沖洗色譜柱，以達到充分平衡。

2.梯度分析時未經充分平衡

在兩次梯度分析間應有足夠的平衡時間。進樣要保證是初始時間的流動相組分流經色譜柱。未經充分平衡時會導致錯誤的保留時間。

3.泵壓力/運行故障

參考流量曲線圖，找出原因并糾正。

4.室溫變化

保證儀器周圍溫度穩定并達到平衡。如果無法達到溫度穩定，或者不能達到平衡，建議使用色譜柱溫箱，柱溫箱系統應*將色譜柱封閉。確保預先混合的溶劑能互溶，且流動相已經混合均勻。

5.進樣體積太大、濃度太高

減小進樣體積或稀釋原始樣品（注：使用弱溶劑，進樣體積可增至約為柱體積的10%，使用強溶劑進樣體積能達到柱體積的1%）。

6.色譜柱被污染

用一根性能已知的色譜柱換下被污染的色譜柱，并進行一系列標準樣品分析，比較保留時間，如果保留時間重復，表明原色譜柱已被污染。清洗色譜柱或更換新色譜柱。

快速指南：

1.引起保留時間變化的常見原因是系統不平衡，開始分析前，系統必須平衡好。

2.分析過程中溫度改變是保留時間變化的另一主要原因。

3. 建議在等度分離中盡量預先混合好流動相。