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當前位置:深圳欣博盛生物科技有限公司>>轉染試劑>> MIR6603/6604/6600TransIT®-Lenti Transfection Reagent

TransIT®-Lenti Transfection Reagent

參   考   價: 1500

訂  貨  量: ≥1 

具體成交價以合同協議為準

產品型號MIR6603/6604/6600

品       牌Mirus Bio/美國

廠商性質代理商

所  在  地深圳市

更新時間:2016-11-24 15:33:38瀏覽次數:1262次

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產品特點:
高性能——高達八倍的功能性滴度
操作簡便——無需更換培養液基
無動物源性成分——安全可靠

 

TransIT®-Lenti Transfection Reagent

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【Mirus新品*】TransIT®-Lenti Transfection Reagent——重組慢病毒生產的理想選擇

 

 

Mirus公司新推出轉染試劑TransIT®-Lenti Transfection Reagent,該產品適用于將載體轉染至貼壁的HEK 293T細胞中,可提高轉染效率,增加重組慢病毒產量。

 

 

產品特點:

高性能——高達八倍的功能性滴度

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產品信息

 

TransIT®-Lenti Transfection Reagent

品貨號

產品規格

供應商

MIR 6603

1 × 0.3 ml

Mirusbio

MIR 6604

1 × 0.75 ml

Mirusbio

MIR 6600

1 × 1.5 ml

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產品信息

 

TransduceIT™ Transduction Reagent

產品貨號

產品規格

供應商

MIR 6620

1 ml

Mirusbio

 

 

1. TransIT-Lenti轉染試劑具有高功能性滴度.分別使用TransIT-Lenti (3:1, vol:wt), Lipofectamine® 2000 (3:1), Lipofectamine® 3000 (3:1:1), 25 kDa PEI (6:1), CaPO4 precipitation (4 µg pDNA/well)五種試劑將MISSION®載體(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™載體和慢病毒包裝試劑)轉染至貼壁293T/17細胞中。收集上清液,過濾(0.45 µm),用293T/17細胞滴定。慢病毒轉導實驗使用了TransduceIT™8 µg/ml),轉導72h后使用guava easyCyte™ 5HT流式細胞儀檢測GFP表達情況。功能性滴度根據病毒的稀釋液與20% GFP陽性細胞進行計算。

 

 

2使用TransIT-Lenti實現高效轉染. 使用TransIT®-Lenti轉染試劑 (3:1, vol:wt)MISSION®載體(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™載體和慢病毒包裝試劑)轉染至貼壁293T/17細胞中。轉染48h檢測GFP效率圖片于轉染48h后拍自熒光顯微鏡。鏡下細胞變圓和細胞融合是由于假型化重組慢病毒VSV-G 蛋白的高表達

 

 

 

重組慢病毒顆粒和靶細胞感染概述

 

(1) 將包括編碼目的基因、水泡性口炎G蛋白(VSV-G)和必需的病毒蛋白(例如gagpolrev)的3-4種質粒轉染至生產細胞(例如293T)中。

(2) 病毒從生產細胞漿膜出芽的方式組裝及釋放到上清液中,并以VSV-G的囊膜蛋白包裹。將含有病毒的培養液用0.45微米的濾器進行過濾以除去細胞。

(3) 重組病毒顆粒轉導靶細胞常用陽離子聚合物來增加聚合和攝取。病毒進入細胞后脫衣殼,將RNA基因組和病毒的酶暴露出來。病毒RNA被逆轉錄成DNA,然后整合到宿主基因組中。

(4) 轉錄和翻譯后由細胞產生目的基因所編碼的蛋白質。

 

 

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