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畜禽肉中土霉素，四環(huán)素，金霉素的測(cè)定
食品安全檢驗(yàn)手冊(cè) 101 頁(yè)
１.原理 樣品中土霉素，四環(huán)素，金霉素經(jīng)提取，用微孔濾膜過(guò)濾后進(jìn) HPLC 色譜儀測(cè)定
２.試劑和材料
⑴乙腈 色譜純
⑵高氯酸 分析純;
⑶高氯酸溶液 5%(V/V)
⑷土霉素標(biāo)準(zhǔn)品 純度≥99%;
⑸土霉素標(biāo)準(zhǔn)貯備液 準(zhǔn)確稱(chēng)取 10.0mg 土霉素,用甲醇配制濃度為 100μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)貯
備液。
⑹土霉素標(biāo)準(zhǔn)中間液: 準(zhǔn)確吸取 5.0mL 土霉素標(biāo)準(zhǔn)貯備液,于 50mL 容量品瓶中,加水稀
釋至刻度。搖勻,此液 1mL 含 10μg 氯霉素。
⑺土霉素標(biāo)準(zhǔn)系列溶液: 準(zhǔn)確吸取土霉素標(biāo)準(zhǔn)中間液 0.1,0.2,0.5,1.0，2.0mL 分別放于
10mL 容量瓶中,然后,各加水至 10.0mL. 搖勻,即得每 mL 含 0.1, 0.2, 0.5, 1.0 .2.0μg 的土霉素
標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。
３.儀器和設(shè)備
(1) 液相色譜儀，配有紫外吸收儀;
(2) 勻質(zhì)器；
(3) 離心機(jī)：6000r/min。
４.測(cè)定步驟
（1） 提取 稱(chēng)取試樣 5g(至 0.01g)， 置于 50mL 離心管中， 加人 25mL 高氯酸溶液：
5%(V/V), 超聲提取 20min, 然后離心 10min ( 4000r/min )。取上清液，經(jīng) 0.45µm 濾膜
過(guò)濾后，濾液作 HPLC 用。
（2）測(cè)定液相色譜參考條件
色譜柱:Grace Smart C 18 250mmX4.6mm, 5µm;