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廣州同譜實驗儀器有限公司
主營產品： kromasil色譜柱,通用石墨管,SPE固相萃取小柱 |
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2020-12-16 閱讀(2855)
應用簡介
本實驗采用固相萃取結合高效液相色譜串聯熒光檢測器（SPE-HPLC) 的方法，建立了香油中苯并芘殘留量的檢測方法。香油經正己烷溶解，Cleanert Silica和Cleanert BAP-3固相萃取柱凈化，Venusil ASB C18色譜柱（4.6 × 250 mm，5 μm，150 Å）分離，水和乙腈為流動相進行等度洗脫，外標法進行定量。結果表明，苯并芘添加量為0.1 mg/kg時，回收率在80% ~ 100%之間，能夠滿足檢測要求。——應用編號：AF10098
苯并芘又稱苯并（α）芘，英文縮寫BaP，是一種常見的高活性間接致癌物和突變原。BaP存在于煤焦油、各類炭黑和煤、及焦化、煉油，瀝青、塑料等工業污水中。肉和魚中的BaP含量取決于烹調方法，水果、蔬菜和糧食中的BaP含量取決其來源。主要來自洗刷大氣的雨水水中的BaP以吸附于某些顆粒上、溶解于水中和呈膠體狀態等三種形式存在，其中大部分吸附在顆粒物質上。BaP被認為是高活性致癌劑，但并非直接致癌物，必須經細胞微粒體中的混合功能氧化酶激活才具有致癌性。BaP不僅廣泛存在于環境中，而且與其它多環芳烴的含量不一定的相關性，長期生活在含BaP的空氣環境中會造成慢性中毒。許多國家的動物實驗證明，BaP具有致癌、致畸、致突變性。危險特性，遇明火、高熱可燃。受高熱分解放出有毒的氣體因此通過有效的實驗技術手段，對香油中的有關苯并芘殘留進行監控，以確保消費者對食品消費的安全具有重要意義。
本實驗通過優化前處理方法建立了苯并芘在香油中的高效液相色譜方法。
實驗部分
儀器、試劑與材料
主要儀器設備
高效液相色譜儀（配熒光檢測器）
試劑材料
正己烷、二氯甲烷、乙腈均為色譜純；實驗用水為超純水；苯并芘標準品（純度99%）；一次性無菌注射器；針式過濾器PTFE(0.22 μm，直徑13 mm)；
Cleanert Silica固相萃取柱柱：500 mg/6 mL（貨號：SI5006）；Cleanert BAP-3固相萃取柱柱：500 mg/6 mL （貨號：Bap5006）
樣品制備
樣品處理
稱取香油0.5 g，置于12 mL樣品瓶中，加入3 mL正己烷，渦旋震蕩溶解，作為待凈化液。
樣品凈化
取Cleanert BAP-3萃取柱(500 mg/6 mL)，需在柱上串聯一只Cleanert Silica固相萃取柱，依次用5 mL二氯甲烷，5 mL正己烷活化小柱；將上述待凈化液上樣到小柱上，然后用2 mL正己烷潤洗樣品瓶，將潤洗液也上樣到柱上，先用5 mL正己烷淋洗串聯柱，待溶液*滴至Cleanert BAP-3上，將Silica硅膠柱棄去，再用5 mL正己烷淋洗Cleanert BAP-3柱，棄去淋洗液；后用5 mL二氯甲烷洗脫，收集；40℃氮氣吹干洗脫液，用1 mL乙腈溶解定容，超聲10 s，過0.22 μm PTFE濾膜后進HPLC檢測。
實驗條件：液相條件
色譜柱：Venusil ASB C18，5 μm，150 Å，4.6 × 250 mm
流動相：水︰乙腈= 12︰88
柱 溫：30℃
進樣量：20 μL
流 速：1.0 mL/min
發射波長：406 nm；激發波長：384 nm
結果與討論
由表1可知，采用固相萃取結合高效液相色譜法檢測苯并芘的加標回收率在80% ~100%之間，CV值小于10%，能夠滿足檢測要求。由圖可看出經Cleanert Silica串聯Cleanert BAP-3柱凈化，采用Venusil ASB C18色譜柱檢測得到的苯并芘峰形良好，且保留時間穩定。
實驗結果
表1. 香油中苯并芘實驗結果
物質名稱 | 加標量/(mg/kg) | 平均回收率/% | CV/% | RT/min |
苯并芘 | 0.1 | 90.2 | 2.2 | 8.41 |
結論
本實驗建立了香油中苯并芘殘留量的前處理方法，并結合高效液相色譜對香油中苯并芘的殘留量進行了測定。對于加標量為0.1 mg/kg的樣品進行了檢測，回收率在80% ~ 100%之間，符合要求。
附：相關產品
產品名稱 | 規格描述 | 包裝數量 | 訂貨號 |
Venusil ASB C18 | 5µm，150Å，4.6×250mm | 1支 | VS952505-0 |
Cleanert BAP-3 | 500mg/6mL | 30支/pk | Bap5006 |
Cleanert Silica | 500mg/6mL | 30支/包 | SI5006 |
保護柱套 | 適用于4.6*10mm和2.1*10mm | 1支 | SH-100 |
直聯式保護柱芯 | 5µm，150Å；4.6*10mm | 4支/包 | VS950105-0S |
1.5 mL樣品瓶 | 短螺紋透明帶書寫處 32*11.6mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 mL樣品瓶蓋 | 9mm中心孔藍蓋，紅色橡膠/米色PTFE隔墊 45°Shore A; 1.0mm | 100/pk | 0915-1819 |
針式過濾器PTFE | 單膜，13mm，0.22µm | 100個/包 | AS041320-T |
一次性注射器 | 2 mL無針頭 | 100支/包 | LZSQ-2ML |
正己烷 | 4 L/瓶，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH216-4 |
二氯甲烷 | 4 L/瓶，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH300-4 |
乙腈 | 4 L/瓶，色譜純 | 4×4 L/箱 | AH015-4 |
SPE-M08正壓型多功能固相萃取裝置 | 8 通道 | 1 臺 | SPE-M08 |
15位氮吹儀 | 15位 | 1 臺 | NV15-M |
