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大腸桿菌轉化時免熱激及孵育的方法

閱讀:2143      發布時間:2015-6-4
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   中山大學的徐曉鵬博士向大家介紹了一種質粒轉化大腸桿菌時免熱激及孵育的方法。

   背景:目前外源質粒轉化大腸桿菌的步驟,需要先將質粒和感受態細胞在冰上撫育半小時,然后42度熱激90秒,加液體培養基緩搖1個小時左右再離心涂板。其中熱激步驟溫度和時間要求嚴格,熱激后大量菌細胞死亡,還要經過液體培養基撫育才能涂板。

   這個方法我們一直在用,質粒可以成功轉進菌體中,只要感受態細胞沒有問題,其轉化率和使用熱激法差不多,而且若是新鮮制備的感受態細胞,轉化率甚至更高。可以省下42度水浴裝置的儀器,還節省了至少1個小時的時間。

 大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA 檢測試劑盒Rat Pentosidine ELISA Kit  96T/48T
 大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 檢測試劑盒Rat 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit  96T/48T
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 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA 檢測試劑盒Rat bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit  96T/48T
 大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA 檢測試劑盒 Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit  96T/48T
 大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 檢測試劑盒Rat Cathepsin K,cath-K ELISA Kit  96T/48T
 細胞大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA 檢測試劑盒Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit  96T/48T
 大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA 檢測試劑盒Rat Collagenase I ELISA Kit  96T/48T
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