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分光光度計(jì)的測定條件如何選擇?

閱讀:7821      發(fā)布時(shí)間:2020-3-23
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       分光光度計(jì)可滿足各種應(yīng)用的要求,可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學(xué)研究、 環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、衛(wèi)生防疫等領(lǐng)域。
  分光光度計(jì)的光源燈采用6V/10W插入式鎢鹵素?zé)?,更換時(shí)應(yīng)先切斷電源,取出損壞的鎢鹵素?zé)簦瑩Q上新燈,將儀器的波長置于500nm處,開啟儀器電源,移動燈上、下、左、右位置,直到成象在進(jìn)狹縫上。在T狀態(tài),不調(diào)節(jié)100%鍵,(蓋上樣品室蓋)觀察顯示讀數(shù),調(diào)整燈使顯示讀數(shù)為高即可。
  分光光度計(jì)的測定條件的選擇:
  一、入射光波長的選擇
  在大吸收波長處測定吸光度不僅能獲得高的靈敏度,而且還能減少由非單色光引起的對朗伯-比爾定律的偏離。因此在分光光度計(jì)的分光光度法測定中一般選擇大吸收波長為入射波長。
  二、參比溶液的選擇
  在實(shí)驗(yàn)中,要選擇合適的空白溶液作為參比溶液來調(diào)節(jié)分光光度計(jì)的零點(diǎn),以便消除顯色溶液中其他有色物質(zhì)的干擾,抵消吸收池和試劑對入射光的影響。根據(jù)試樣溶液的性質(zhì),選擇合適組分的參比溶液很重要。
  三、吸光度范圍選擇與控制
  任何分光光度計(jì)都有一定的測量誤差,測量誤差的來源主要是光源的發(fā)光強(qiáng)度不穩(wěn)定法,光電效應(yīng)的非線性,電位計(jì)的非線性,雜散光的影響,單色器的光不純等因素,對于一臺固定的分光光度計(jì)來說,以上因素都是固定的,也就是說它的誤差具有一定穩(wěn)定性。
  四、比色皿的使用
  選擇適宜規(guī)格的比色皿,盡量把吸光度值調(diào)整在0.2~0.8之間。同一實(shí)驗(yàn)使用同一規(guī)格的同一套比色皿,以減少測量誤差,所以用普通分光光度法不適用于高含量或較低含量物質(zhì)的測定。
  分光光度計(jì)是一種常用的實(shí)驗(yàn)室分析儀器,面對眾多品牌和型號的分光光度計(jì),用戶該應(yīng)適宜選擇合適的分光光度計(jì)。盡管分光光度計(jì)種類繁多,但不外乎簡易型、中檔型和型三大類。

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