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分光色度儀的測試步驟演示案例
閱讀：2567發布時間：2015-12-8
一、原理
碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應生成淡黃棕色膠態化合物，其色度與氨氮含量成正比，通常可在波長410 — 425nm 范圍內測其吸光度，計算其含量。本法zui低檢出濃度為 0.025mg/L （光度法），測定上限為 2mg/L 。
二、儀器
1 ． 500mL 全玻璃蒸餾器 。
2 ． 50mL 具塞比色管。
3 ．分光光度計。
4 ． pH 計。
三、試劑
配制試劑用水均應為無氨水。
1 ．無氨水：可用一般純水通過強酸性陽離子交換樹脂或加硫酸和高錳酸鉀后，重蒸餾得到。
2． 1mol/L 氫氧化鈉溶液。
3． 吸收液：①硼酸溶液：稱取 20g 硼酸溶于水中，稀釋至 1L 。
② 0.01mol/L 硫酸溶液。
4 ．納氏試劑：稱取 16g 氫氧化鈉，溶于 50mL 水中，充分冷卻至室溫。
另稱取 7g 碘化鉀和碘化汞 (HgI2) 溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中。用水稀釋至 100mL ，貯于聚乙烯瓶中，密塞保存。
5 ．酒石酸鉀鈉溶液：稱取 50g 酒石酸鉀鈉 (KNaC4H4O6 · 4H2O) 溶于 100mL 水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至 100mL 。
6 ．銨標準貯備溶液：稱取 3.819g 經 100 ℃干燥過的氯化銨 (NH4Cl) 溶于水中，移入 1000mL 容量瓶中，稀釋至標線。此溶液每毫升含 1.00mg 氨氮。
7 ．銨標準使用溶液：移取 5.00mL 銨標準貯備液于 500mL 容量瓶中，用水稀釋至標線。此溶液每毫升含 0.010mg 氨氮。
四、測定步驟
1 ．水樣預處理：無色澄清的水樣可直接測定；色度、渾濁度較高和含干擾物質較多的水樣，需經過蒸餾或混凝沉淀等預處理步驟。
2 ．標準曲線的繪制：吸取 0 、 0.50 、 1.00 、 3.00 、 5.00 、 7.00 和 10.0mL 銨標準使用液于 50mL 比色管中，加水至標線，加 1.0mL 酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加 1.5mL 納氏試劑，混勻。放置10min 后，在波長 420nm 處，用光程 10mm 比色皿，以水為參比，測定吸光度。
由測得的吸光度，減去零濃度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，繪制以氨氮含量（ mg ）對校正吸光度的標準曲線。
3 ．水樣的測定：分取適量的水樣（使氨氮含量不超過 0.1mg ），加入 50mL 比色管中，稀釋至標線，加 1.0mL 酒石酸鉀鈉溶液（經蒸餾預處理過的水樣，水樣及標準管中均不加此試劑），混勻，加 1.5mL的納氏試劑，混勻，放置 10min 。
4 ．空白試驗：以無氨水代替水樣，作全程序空白測定。
五、計算
由水樣測得的吸光度減去空白實驗的吸光度后，從標準曲線上查得氨氮含量（ mg ）。
氨氮 (N,mg/L)=m × 1000/V
式中： ——由校準曲線查得樣品管的氨氮含量（ mg ）；
V ——水樣體積（ mL ）。
注意事項
1 、納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對顯色反應的靈敏度有較大影響。靜置后生成的沉淀應除去。
2 、濾紙中常含痕量銨鹽，使用時注意用無氨水洗滌。所用玻璃器皿應避免實驗室空氣中氨的沾污。
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