當(dāng)您的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)負(fù)值

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)假如按上訴方法處理后查看仍有負(fù)值，則處理數(shù)據(jù)時可以選用2個方法：這即是在咱們的說明書中主張查看血清時做1:2稀釋的要素。
標(biāo)準(zhǔn)曲線只取標(biāo)準(zhǔn)曲線的下面4~5個點(diǎn)，即125，62.5，31.25，15.625，7.8，0，或62.5，31.25，15.625，7.8、3.9、0。
除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀釋外，其它一些細(xì)胞因子都要做1:2稀釋（這在咱們的說明書中有提示）。
做法是：先在樣本孔中加50ul試劑稀釋液（試劑盒中已備），再加50ul樣本。
ELISA試劑盒人為的把“0”pg/ml點(diǎn)OD值降低。原則是把“0”OD值降到比zui低的樣本OD略低一點(diǎn)，盡可能使樣本的含量滿是正值，一同確保改動“0”OD值后的標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)（r）＞0.98。
求出樣本含量后需求乘上稀釋倍數(shù)2。
原則是把樣本的OD值全包括，標(biāo)準(zhǔn)曲線又能至少有4個點(diǎn)。也即是把標(biāo)準(zhǔn)曲線的下端（即樣本含量會合的這一段）拓寬，求出的數(shù)據(jù)更可靠。
這么改動后，一般樣本都能得到數(shù)據(jù)，低的樣本出來了，高的樣本含量也會高一些。
因?yàn)楹怂銜r是相對含量的比照，所以不會影響ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)核算效果。
ELISA試劑盒血清中有些細(xì)胞因子的檢出率很低，血清中又富含很多大分子雜蛋白，在血清濃度較高時簡略隱秘抗原的表位，因此在測血清原液經(jīng)常出現(xiàn)負(fù)值。