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小鼠肺栓塞模型

時間:2017-4-19閱讀:1203
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小鼠肺栓塞模型

肺血栓栓塞癥(PTE)是內源性或外源性血栓栓子堵塞肺動脈所引起肺循環障礙的臨床和病理生理綜合征,是一種相對常見的心血管急重癥,其因栓子堵塞肺動脈血管床從而引起危及生命的右心衰竭。其發病率在心血管疾病中僅次于冠心病和高血壓,未經及時治療的肺栓塞死亡率高達20%~30%,由于對該病的認識不足,加上其臨床表現缺乏特異性,誤漏診率高達70%~90。該病發病率高,預后嚴重,是肺部疾患中zui常見的死亡原因.

    1.實驗動物

    SPF級Balb/C小鼠,雄性,周齡為4w~6w,體重為22g~26g。

2.實驗分組:

實驗分組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組,每組15只。

3.主要試劑

凝血酶

    4.建模方法

4.1選取體重22g-26g的小鼠,以3%戊巴比妥鈉,以80mg/kg劑量腹腔麻醉小鼠,小鼠取仰臥位,將四肢和頭部用膠布固定在解剖板上,用8%硫化鈉對頸部脫毛,活力碘消毒后準備手術。

4.2頸部正中切口,逐步分離軟組織和肌肉,暴露左側頸靜脈,向頸內靜脈注射

凝血酶溶液(溶于0.9%生理鹽水,劑量20U/kg)。

4.3清理術野,縫合頸部切口,待小鼠清醒后,將其放回潔凈籠具后放回飼養室飼養,定期觀察小鼠狀態及死亡情況并做好記錄。

4.4假手術除僅向頸靜脈注射生理鹽水以外,其他操作均相同。

4.5 在模型建立后24h,分別處死小鼠,取左側部分肺組織于4%多聚甲醛溶液固定,石蠟包埋;其余肺組織-80度保存。

 

5.模型的評價

5.1外周血血小板計數

取小鼠外周血20μl,置于盛有380μl (10g/L)草酸氨稀釋液的無菌EP管中,混勻后用血球記數板行血小板計數。

5.2組織病理評價

取左肺4%多聚甲醛固定,然后將肺組織常規脫水,石蠟包埋,切片(厚度為5μm),HE染色。術后幾小時即可見肺泡里大量滲出并有出血,肺泡間隔增厚,其內大量炎性細胞浸潤,可見較大的動脈栓塞,血小板和紅細胞聚集粘附在栓子周圍。

5.3統計學處理

應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(`x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯著性差異,P<0.01表示有極顯著性差異。

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