人磷酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒基因工程抗原是抗原基因在質粒載體中原核或真核表達的蛋白質抗原，多以大腸桿菌或 酵母 菌為表達系統。該類抗原與合成肽相比具有以下特點：

a.分子量大。合成肽采用化學方法制備，由于工藝的局限，合成數量有限，只能達到數百個氨基酸;而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。

b. 人磷酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒穩定性好。包被的抗原的穩定性可使 試劑 盒的效期得到保證，早期以合成肽為包被抗原的 試劑 盒效期只有3-4 個月，采用基因工程抗原后效期大大延長了。

c.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達，表達產物包含更多的抗原決定簇，可提高 試劑 盒的靈敏度，提高檢出率。

d. 純化難度大。基因工程抗原的純化技術難度較大。

人磷酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒準備因子捕獲微球

1) 計算試驗管的數目：包括標準品、樣品、設定和對照管

例：8個血清樣本，7個標準稀釋液，1個陰性對照，1個設定管，共17個管。考慮每次可能產生氣泡等損失，因此，多算3個管，即20個

標準品管數+血清標本數+3=總管數

2) vortex每一個捕獲微球懸液管數秒。

3) 混合微球懸液：

每個試驗管加入25uL混合微球懸液，如20次試驗管，則V=20×25μL=500μL，每種微球加V的1/20（也就是25μL）標記"mixed captured beads"，RDB定容至V。

4) 3000g離心5min,小心吸走上清450μL,留50ul。

1. 加入450ul RDB,斡旋混勻5s。混勻的捕獲微球現在準備轉移到試驗管中（每個試驗管中加入25ul的混勻微球）

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