小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因分析

ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法。Engvall 和Perlmann于1971年zui先應(yīng)用該法進(jìn)行了IgG定量測(cè)定，并命名為"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：

①使抗原（或抗體）結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性；

②使抗原（或抗體）與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原（或抗體），而且此酶標(biāo)抗原（或抗體）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；

③測(cè)定時(shí)將受檢標(biāo)本（抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原（或抗體）按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng)，再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例；再加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物，根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析，以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。

小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒添加回收的幾種誤區(qū)：

    呋喃類代謝物提取過程通常分三個(gè)關(guān)鍵步驟：

 水解-----衍生化-----提取

 (1)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的zui大標(biāo)準(zhǔn)濃度進(jìn)行添加回收。如德國(guó)拜發(fā)和我公司AOZ試劑盒中的第6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)4.05ppb，AMOZ試劑盒中的第6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)8.1ppb。因?yàn)檫@些標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)過衍生化后的標(biāo)準(zhǔn)品，不能代表樣本前處理實(shí)驗(yàn)中的加酸水解和加衍生化試劑衍生這兩個(gè)步驟，所以就算回收率很高，但失去了實(shí)際參考價(jià)值。

 （2）*依賴未衍生的代謝物標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行添加回收。因部分未衍生的代謝物在配制成標(biāo)準(zhǔn)品后有一定的有效期，會(huì)存在潛在的不穩(wěn)定因素，而且添加回收僅能考證衍生化和提取兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，不能驗(yàn)證從組織蛋白中水解呋喃類代謝物的過程，因此也有一定的局限性。

 的評(píng)價(jià)方案：采用經(jīng)LC-MS-MS確證的陰陽性樣品，留作質(zhì)控樣品，對(duì)檢測(cè)的樣本和試劑盒進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。這也是實(shí)驗(yàn)室所出數(shù)據(jù)可信度說服力的關(guān)鍵點(diǎn)。

加樣

 在小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。

  加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

小鼠白介素4(IL4)小鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒其他產(chǎn)品展示：xyA145Hu 人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGFC)ELISA試劑盒
xyA146Hu 人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGFD)ELISA試劑盒
xyA150Hu 人癌胚抗原(HZA)ELISA試劑盒
xyA151Hu 人激肽釋放酶3(KLK3)ELISA試劑盒
xyA154Hu 人糖抗原125(CA125)ELISA試劑盒
xyA155Hu 人糖抗原15-3(CA15-3)ELISA試劑盒
xyA156Hu 人糖抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒
xyA159Hu 人鱗狀細(xì)胞癌抗原2(SCCA2)ELISA試劑盒
xyA163Hu 人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒
xyA165Hu 人胃蛋白酶原A(PGA)ELISA試劑盒
xyA166Hu 人胃蛋白酶原C(PGC)ELISA試劑盒
xyA167Hu 人前列腺素E合酶(PTGES)ELISA試劑盒
xyA168Hu 人前列腺酸性磷酸酶(ACP3)ELISA試劑盒
xyA174Hu 人髓鞘型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP8)ELISA試劑盒
xyA180Hu 人Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒
xyA213Hu 人髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)ELISA試劑盒
xyA228Hu 人抗繆勒管激素(AMH)ELISA試劑盒
xyA234Hu 人免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA試劑盒
xyA252Hu 人載脂蛋白C1(APOC1)ELISA試劑盒
xyA253Hu 人麥芽糖酶糖化酶(MGA)ELISA試劑盒
xyA259Hu 人膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒
xyA260Hu 人β2-微球蛋白(β2M)ELISA試劑盒
xyA262Hu 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)ELISA試劑盒
xyA275Hu 人抗SSB/La抗體(Anti-La)ELISA試劑盒
xyA277Hu 人間隙連接蛋白43(CX43)ELISA試劑盒
xyA278Hu 人踝蛋白(TLN)ELISA試劑盒
xyA281Hu 人B-細(xì)胞激活因子受體(BAFFR)ELISA試劑盒
xyA282Hu 人組蛋白H2A(H2A)ELISA試劑盒
xyA288Hu 人抗雙鏈DNA抗體(Anti-dsDNA)ELISA試劑盒
xyA306Hu 人組織蛋白酶L(CTSL)ELISA試劑盒
xyA310Hu 人載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒
xyA329Hu 人多功能肽酶2(LMP2)ELISA試劑盒