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青島捷世康生物科技有限公司
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酸溶血定性檢測試劑盒說明書

時間:2025/3/28閱讀:211
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產品簡介:

紅細胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數量最多的一種血細胞,脊椎動物體內通過RBC運送氧氣,RBC同時還具有免疫功能。在貧血檢查中可通過蔗糖水溶血試驗來檢測紅細胞膜的缺陷,尤其適用于檢測陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥(paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,PNH),該癥為獲得性紅細胞膜缺陷引起的慢性血管內溶血,常在睡眠時加重,可伴發性血紅蛋白尿和全血細胞減少。

 酸溶血定性檢測試劑盒是利用PNH紅細胞對補體敏感性增高,在酸化的血清中經過37℃孵育,易溶血,血清經過56℃加熱30min,使補體滅活,病人紅細胞不溶解,該試劑盒主要用于檢測人、動物血液的紅細胞膜的缺陷,尤其用于鑒定陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。 

自備材料:

1、生理鹽水

2、與患者同血型的正常新鮮血液

3、水浴鍋

 

操作步驟(僅供參考):

1、制備脫纖維血清:取患者和與患者同血型的正常人靜脈血 5ml,慢慢注入含有3個潔凈玻璃珠的小容器中,立即輕輕的持續搖動,直至纖維蛋白出現并附著于玻璃珠上為止(一    般需要 10~15min)。轉移脫纖維血至潔凈離心管,低速離心,取上清待用,即為脫纖維血清。

2、制備50%紅細胞懸液:取脫纖維血清,經生理鹽水洗滌3次,每次都應顛倒、混勻、離心,盡量吸棄上清液,留下紅細胞沉淀,加入等體積 PNH NaCl Buffer 重新懸浮紅細

胞,即為50%紅細胞懸液。

3、取試管6支,按下表先加入同血型正常人新鮮血清0.5ml,其中 3、6兩支試管在 56℃

水浴30min,使補體滅活,其余4管置于室溫 30min。此后按下表順序操作。

加入物(ml)

待測管

對照管

試管號

1

2

3

4

5

6

正常人新鮮血清

0.5

0.5

0.5

0.5

正常人 56℃滅活血清

0.5

0.5

Acidic Buffer

0.05

0.05

0.05

0.05

50%患者紅細胞懸液

0.05

0.05

0.05

50%正常人紅細胞懸液

0.05

0.05

0.05

混勻,置于 37℃水浴中 1h(30min 時輕輕混勻一次),離心。

陽性結果(溶血)

±

3+


注意:如果PNH 患者第3管(加正常人滅活血清管)溶血,則說明此溶血不依賴于補體,故不是PNH,可能是紅細胞有其他缺陷(如球形紅細胞增多癥),應做進一步鑒別。

參考區間:正常人無溶血。

注意事項:

1、 所用器具必須潔凈干燥,以免溶血造成假陰性。

2、 血清酸化后應注意密閉保存,盡快檢測,避免CO2逸出導致血清酸度降低,影響溶血程度。

3、 如果患者多次輸血,其血液中的不正常細胞會相應減少,可呈弱陽性或陰性。出現這種情況應延長孵育時間至 4~6h,再觀察溶血情況。

4、 該實驗可作為PNH的過篩實驗,陰性可排除 PNH,陽性應做酸化溶血實驗證實。

 

有效期6個月有效。


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