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青島捷世康生物科技有限公司
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DF-1細胞; 雞胚成纖維細胞說明書

時間:2021/1/15閱讀:2840
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產品名稱: DF-1細胞; 雞胚成纖維細胞

  • 細胞數量: 1*10^6
  • 組織來源: 胚胎,自發永生化
  • 細胞種屬: 其他源
  • 生長特性: 貼壁
  • 培養基: DMEM-H
  • 形態特征: 成纖維細胞樣
  • 傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
  • 培養條件: 胎牛血清至終濃度為10%。環境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;溫度,37℃
  • 細胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO)
  • 細胞運輸: 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶)
注意事項
凍存細胞接收后的處理:
1.干冰運輸,收到細胞后立即轉入-80℃冰箱短暫中轉或直接復蘇;
2.收到細胞后,若發現干冰已經*揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。
復蘇細胞接收后的處理:
1.收到細胞后,請首先檢查培養瓶是否破損或漏液,培養液是否混濁,如有漏液及培養液混濁情況請立即拍照把圖片發給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養箱中靜置4-6h后,在顯微鏡下確認細胞狀態并拍照100倍和200倍的照片,若有貼壁細胞脫落,可收集上清離心,將沉淀用新的培養基接種至新的培養瓶或培養皿中。
3.建議收到當天不要消化處理,如果細胞長滿90%,可選擇傳代處理。
4.如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題,出現的細胞問題將不提供免費重發服務。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

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