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青島捷世康生物科技有限公司
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改良番紅0-固綠軟骨染色液說明書

時間:2020/12/25閱讀:1694
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基本信息

 產品簡介:

      軟骨組織由軟骨細胞、軟骨基質和纖維組成,軟骨組織及其周圍的軟骨膜構成軟骨。軟骨根據基質內所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種,例如甲苯胺藍法、阿利新藍法、番紅O 法等。
       改良番紅 0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O 結合呈現紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結合而成綠色或藍色,與呈現紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區分開。番紅O 是一種結合多陰離子的陽離子染料,其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(硫酸軟骨素或硫酸角質素) 結合。番紅O 著色與陰離子的濃度近似成正比關系,間接反映了基質中蛋白多糖的含量和分布。當軟骨受到損傷時,軟骨中的糖蛋白會釋放出來,使基質成分分布不均勻,從而導致番紅O 淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對番紅O 染色的軟骨基質進行定量分析。固綠與膠原纖維結合,不宜褪色。番紅 O-固綠染色的分化很關鍵,分化過度易導致切片不著色,分化不足易導致切片著色過深。

 產品組成:

規格:5*50ml

有效期:6個月有效

 自備材料:

10%福爾馬林固定液,脫鈣液,蒸餾水,系列乙醇。

 操作步驟(僅供參考):

 1、 標本的處理:10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。
2、 常規脫蠟至水。
3、 入新鮮配制的Weigert 染液染色 3-5min,水洗。

4、 酸性分化液分化 15s。

 5、 蒸餾水洗 10min。
6、 在固綠染色液內浸染 5min。
7、 快速用弱酸溶液洗滌切片 10-15s,以便去除殘留的固綠。8、 入Safranin O stain 內浸染 5min。
9、 分別用 95%乙醇、無水乙醇脫水。
10、二甲苯透明,光學樹脂封固。

 染色結果:

 軟骨基質                                                 深紅色 
軟骨細胞核                                             藍色 
細胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織           灰綠色 
軟骨細胞漿                                              紅色 
細胞核                                                     灰黑色 

 改良番紅0-固綠軟骨染色液注意事項:

 1、 需要顯示細胞核時,盡量采用鐵蘇木素染色,其著色力強色調濃,一般的蘇木素著色力不強。
2、 Weigert 蘇木素染液不可預先配制后放置,配制好后一般 24h 失去染色能力。
3、 切片在 Safranin O stain 中染色不宜過長,否則易導致背景的深紅色不易分化掉。
4、 切片分化時間應恰當,以背景呈綠色為宜。
5、 Safranin O stain 染色后,不宜在低濃度乙醇脫水,否則易褪色。
6、 95%乙醇脫水時間不宜過長。
7、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

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