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青島捷世康生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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Trizol (總RNA抽提試劑)

時(shí)間:2020/11/20閱讀:4710
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Trizol是一種用于細(xì)胞或組織總RNA抽提的試劑。本產(chǎn)品采用和Invitrogen公司的TRIzol*相似的原理和方法,抽提的方法和步驟*相同。
Trizol的顏色和TRIzol相同,加入氯后上層呈無(wú)色,下層呈紫紅色,便于吸取上層水相。
Trizol對(duì)動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提均適用。
Trizol可以抽提長(zhǎng)達(dá)15 kb的RNA,也可以抽提microRNA等小RNA。抽提小RNA時(shí)宜-70℃沉淀過(guò)夜。
Trizol抽提所得RNA無(wú)DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值為1.8-2.0。
裂解細(xì)胞或和組織共勻漿時(shí),Trizol可以保持樣品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解。
每一百萬(wàn)細(xì)胞用Trizol抽提可得5-15μg RNA;每毫克組織用Trizol抽提可得1-10μg RNA。產(chǎn)量因細(xì)胞和組織不同而異。
抽提兩個(gè)樣品約需一小時(shí)。
Trizol抽提所得RNA可直接用于Northern,點(diǎn)雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase protection assay,cDNA克隆,以及RT-PCR;也可以用于基因表達(dá)芯片分析、高通量測(cè)序(deep sequencing)等對(duì)RNA質(zhì)量要求較高的情況。
Beyozol(R0011)和Trizol(R0016)的成分有細(xì)微差別,實(shí)際抽提效果無(wú)任何顯著差異。
每100ml Trizol可以抽提100個(gè)六孔板中的樣品或100個(gè)50-80mg的組織樣品。
保存條件:
4℃保存,一年有效。
注意事項(xiàng): 
需自備異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。DEPC(ST036),DEPC水(R0021)可向我司訂購(gòu)。
所有離心管,槍頭及相關(guān)溶液都必須無(wú)RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時(shí)以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過(guò)夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或Milli-Q級(jí)水中,處理過(guò)夜,滅菌即成DEPC水。
使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過(guò)程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會(huì)被釋放出來(lái)并剪切樣品。如果不能及時(shí)抽提RNA,推薦先加入適量Trizol,并裂解樣品后凍存。
必須戴一次性手套操作,且盡量不要對(duì)著RNA樣品呼氣或說(shuō)話,以防RNA酶污染。建議戴一次性口罩操作。
Trizol含有毒物質(zhì)苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請(qǐng)戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏。如皮膚接觸Trizol,請(qǐng)立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請(qǐng)聽取醫(yī)生意見。
Trizol抽提總RNA的同時(shí),理論上也可抽提蛋白和DNA,但未經(jīng)測(cè)試。有興趣者可按Invitrogen公司的TRIzol的操作步驟進(jìn)行操作。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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