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青島捷世康生物科技有限公司
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原卟啉(FEP)檢測試劑盒(熒光比色法)

時間:2020/8/14閱讀:1429
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產品簡介:

原卟啉(Protoporphyrin IX)分子量為 562.66,CAS 號為 553-12-8,在生物體內原卟啉的含量可間接反應鐵的缺乏與否。原卟啉(FEP)檢測試劑盒(熒光比色法)是利用酸化液破壞紅細胞并提取原卟啉(FEP),后者在紫外線照射下會發出熒光,可通過熒光分光光度計等測定 FEP 含量,該試劑盒主要用于檢測人、動物血液的紅細胞內游離原卟啉(FEP)的測定,反映缺鐵性貧血的程度,但應事先或者事后檢測相應的紅細胞比容。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

產品組成:

試劑(A): 肝素鈉溶液(125U/ml) 0.5ml -20℃

試劑(B): 原卟啉Ⅸ標準(5mg/L) 1ml  -20℃ 避光

試劑(C): FEP 酸化液               2×100ml  RT

使用說明書                       1 

自備材料:

1、 生理鹽水

2、漩渦振蕩器、離心機

3、熒光分光光度計

操作步驟(僅供參考)

1、配制肝素抗凝全血:按新鮮全血:肝素鈉溶液(125U/ml)=91 配制。

2、配制原卟啉Ⅸ標準工作液(50μg/L): 室溫溶解原卟啉Ⅸ標準(5mg/L),取 10μl 加至990μl  FEP 酸化液,混勻,即為原卟啉Ⅸ標準工作液(50μg/L)4℃可保存 1 周。

3、按下表進行操作,并以生理鹽水作為空白對照

                           空白管     標準管   待測管

肝素抗凝全                                                            0.05

原卟啉Ⅸ標準工作液(50μg/L)                   0.05       

生理鹽水                                                 0.05                 

FEP 酸化液(ml)                                 3.5          3.5     3.5

4、置于漩渦振蕩器上振蕩 23min,3000 r/min 離心 6min,取上清。

5、熒光分光度計進行熒光度測定(激發濾片 400nm,發射濾片 600nm),以空白管作為調零點,標準管校熒光強度并調至 100,讀取待測管的熒光強度讀數(Fu )。

6、另用該肝素抗凝全血測紅細胞比容(PCV ),紅細胞比容常采用臨床檢驗科的血細胞自動分析儀進行測定。

結果計算:FEP(μg/L,RBC)=35×(Fu/PCV )

參考區間: 正常人: (398.4±131.7)ug/L RBC

注意事項:

1、 整個操作均應在避光條件下進行,并盡快完成。

2、 原卟啉在強光下易分解,收集好的血液樣本應立即 4℃避光保存,24h 以內用完。

3、 熒光強度會隨著時間的延長而逐漸衰退,但 2h 以內基本穩定。

4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期:6 個月有效。

 

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