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PC0010-Solarbio-Bradford蛋白濃度測定試劑盒(2500T)
  • PC0010-Solarbio-Bradford蛋白濃度測定試劑盒(2500T)
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貨物所在地:北京北京市

地: Solarbio

更新時間:2025-02-25 21:00:07

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考馬斯亮蘭G-250染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的Z大吸收峰的位置(Imax),由465nm變為595nm,在一定的濃度范圍內,測定的吸光度值A595與蛋白質濃度成正比。Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響,樣品中巰基乙醇的濃度可高達1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM,但受略高濃度的去垢劑影響,需確保SDS的濃度低于0.1%,Triton X-100低于

Bradford蛋白濃度測定試劑盒

Bradford蛋白濃度測定試劑盒操作說明: 
一.微孔酶標儀法
1.  *溶解蛋白標準品,取10ul,稀釋250ul ,使終濃度為0.2mg/ml。待測蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標準品。
2. 5×G250染色液使用前請顛倒3-5次混勻,取1ml 5×G250染色液,加入4ml雙蒸水,混勻成1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
3.  將標準品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分別加到96孔板中,加PBS稀釋液補足到20微升。
4.  將樣品作適當稀釋(好多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
5.  各孔加入200微升稀釋后的1×G250染色液,室溫放置3-5分鐘。
6.  用酶標儀測定A595,或560-610nm之間的其它波長的吸光度。
7.  根據標準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。

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