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FDA水解酶活性檢測試劑盒

操作步驟：

一、 樣本處理稱取風(fēng)干過 30-50 目篩土壤約 0.1g，備用。

二、 測定操作表空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 對照管 測定管樣本（g） 0.05 0.05 標(biāo)準(zhǔn)液（μL） 40 雙蒸水（μL） 40 試劑一（μL） 200 200 240 200 試劑二（μL） 40 充分混勻，30℃，震蕩 1h 試劑三（mL） 160 160 160 160 10000g，25℃，離心 5min，取 200μL 上清于微量石英比色皿/96 孔板中測定 490nm 處吸光值 A，△ A1=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管，△ A2=A 測定管-A 對照管

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

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標(biāo)準(zhǔn)液：液體 4mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑 1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加 4mL 試劑三溶解。

試劑三：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。

酶活性計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生 1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。 FDA 活性（μmol/d/g）=（△ A2÷△ A1×C 標(biāo)準(zhǔn)品）×V 反總÷W = 2.4×（△ A2÷△ A1）÷W

b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

酶活性定義：每克土壤每天產(chǎn)生 1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。 FDA 活性（μmol/d/g）=（△ A2÷△ A1×C 標(biāo)準(zhǔn)品）×V 反總÷W = 2.4×（△ A2÷△ A1）÷W C 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度 100μmol/L；V 反總：反應(yīng)總體積，0.4mL；W：樣本質(zhì)量，g

注意事項：

1. 盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品，否則很難準(zhǔn)確反映酶的活性。

2. 測定之前進(jìn)行預(yù)實驗，若吸光值較高，請進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

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