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細胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)
操作步驟(僅供參考)：
(一)、MDC單獨染色：
1、 用去離子水稀釋10×Wash buffer1×。
2、 800g離心5min，收集細胞，用300～400μl的1×Wash buffer清洗細胞1次，棄上清。
3、 加入適量的1×Wash buffer重懸細胞，計數并調節細胞濃度10 6 /ml。
4、 取適量90μl的細胞懸液新的EP管中，加入10μl的MDC Stain，輕輕混勻。
5、 室溫避光染色15～45min。
6、 800g離心5min，收集細胞，用300～400μl的1×Wash buffer清洗細胞2次，棄上清。
7、 加入100μl的Collection buffer重懸細胞，滴加于載玻片上并加蓋玻片。
8、 熒光顯微鏡下觀察(激發濾光片波長355nm，阻斷濾光片波長512nm)，計數并拍照。
細胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)
(二)、與EB雙染色：
1、 用去離子水稀釋10×Wash buffer1×。
2、 800g離心5min，收集細胞，用300～400μl的1×Wash buffer清洗細胞1次，棄上清。
3、 加入適量的1×Wash buffer重懸細胞，計數并調節細胞濃度10 6 /ml。
4、 取適量90μl的細胞懸液新的EP管中，分別加入10μl的MDC Stain和0.2μM EB染色液，輕輕混 勻。
5、 滴加于在玻片上，室溫避光染色15～30min，加蓋玻片。
6、 熒光顯微鏡下觀察(激發濾光片波長512nm)，計數并拍照。
細胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)
注意事項：
1、 MDC Stain和EB試劑有一定毒性，請小心操作。
2、 吖啶橙染色常與EB染色合用，可區分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
3、 操作過程中應注意減少試劑暴露于強光下的時間。
4、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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