培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料。那么LB培養(yǎng)基是什么培養(yǎng)基?LB一般被解釋為L(zhǎng)uria-Bertani，然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法，這個(gè)名字來源于英語lysogeny broth，即溶菌肉湯。LB培養(yǎng)基是近年來用于培養(yǎng)基因工程受體菌(大腸桿菌)的常用培養(yǎng)基之一。
LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱，是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基，生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來預(yù)培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴(kuò)增,達(dá)到使用要求.可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。
LB培養(yǎng)基是一種應(yīng)用*泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱普通培養(yǎng)基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物：酵母經(jīng)破壁后將其中蛋白質(zhì)、核酸、維生素等抽提，再經(jīng)生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、維生素等天然活性成分的淡黃色粉末，其中氨基酸含量30%以上，總蛋白50%以上，核苷酸10%以上，廣泛用作生物培養(yǎng)基和食品調(diào)味品制造原料。
胰化蛋白胨：一種優(yōu)質(zhì)蛋白胨，是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化，濃縮干燥而成的白色粉末，含有豐富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物為微生物提供碳源、能源、磷酸鹽、生長(zhǎng)因子、維生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生長(zhǎng)環(huán)境(如滲透壓)，其次是提供無機(jī)鹽。
在配制固體培養(yǎng)基時(shí)還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時(shí)溶化，一般實(shí)際應(yīng)用時(shí)在沸水浴中或墊以石棉網(wǎng)直接煮沸溶化。瓊脂在40℃時(shí)凝固，通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基中瓊脂的含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。
由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌，因此，要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或微堿性，以利于細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖。
LB培養(yǎng)基配制方法：
配制每升培養(yǎng)基，應(yīng)該在950 ml去液態(tài)lb培養(yǎng)基離子水中加入：胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 搖動(dòng)容器直至溶質(zhì)溶解。用5mol/LNaOH調(diào)pH至7.0。用去離子水定容至1L。在15psi高壓下蒸汽滅菌20min。
LB固體培養(yǎng)基1L和液體一樣，加15g瓊脂粉，一定要在溫度降下之前加好抗固態(tài)LB培養(yǎng)基生素，并且倒好板。
1.配制：100ml LB培養(yǎng)基加入1.5g瓊脂粉。
2.抗生素的加入：高壓滅菌后，將融化的LB固體培養(yǎng)基置與55℃的水浴中，待培養(yǎng)基溫度降到55℃時(shí)(手可觸摸)加入抗生素，以免溫度過高導(dǎo)致抗生素失效，并充分搖勻。
3.倒板：一般10ml倒1個(gè)板子。培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后，打開蓋子，在紫外下照10-15分鐘。
4.保存：用封口膠封邊，并倒置放于4℃保存，一個(gè)月內(nèi)使用。 配400ml的話成分按比例減少就行了，pH還是要按規(guī)定的。
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