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島津液相色譜儀工作中如何避免出現(xiàn)干擾峰的問(wèn)題?

閱讀:2140        發(fā)布時(shí)間:2022-5-13
  島津液相色譜儀中的干擾峰是廣大色譜工作者頭疼的問(wèn)題。那么在它的工作中怎么避免出現(xiàn)這類的問(wèn)題呢?
  

島津液相色譜儀

 

  1、試劑/溶劑
  
  在高效液相色譜中,常用的試劑主要是有機(jī)溶劑、各種鹽類和水。大多數(shù)有機(jī)溶劑都是購(gòu)買色譜級(jí)的,所以出現(xiàn)問(wèn)題的概率很小。但由于重復(fù)使用,分裝有機(jī)溶劑被污染的概率較高,因此引入干擾峰的概率較高。二是水。水中的雜質(zhì)是干擾峰的主要來(lái)源之一,很容易被忽略。對(duì)于采集波長(zhǎng)較低的檢測(cè)方式,推薦使用優(yōu)質(zhì)水,可以避免很多水質(zhì)問(wèn)題。三是鹽類種類繁多,也是色譜干擾峰的主要來(lái)源之一。
  
  對(duì)于水和無(wú)機(jī)鹽造成的干擾峰,較快的解決辦法是加裝鬼峰補(bǔ)充收集柱,可以有效避免這種干擾。如果使用離子對(duì)試劑,應(yīng)選擇不影響離子對(duì)試劑的鬼峰互補(bǔ)柱。
  
  2、設(shè)備
  
  干擾峰來(lái)源的第二個(gè)方面是流動(dòng)相制備和樣品預(yù)處理過(guò)程中的各種設(shè)備。
  
  首先是島津液相色譜儀制備流動(dòng)相時(shí)接觸的設(shè)備,包括燒杯、玻璃棒、pH計(jì)、濾杯、濾膜、流動(dòng)相瓶等。燒杯和玻璃棒是制備流動(dòng)相的接觸設(shè)備。因此,建議僅使用制備流動(dòng)相的燒杯和玻璃棒。濾杯測(cè)試儀只要清洗干凈,就不會(huì)帶來(lái)污染。需要注意的是,如果含有離子對(duì)的流動(dòng)相被過(guò)濾,建議增加清洗次數(shù),以免污染后續(xù)流動(dòng)相。因此,對(duì)濾杯的清洗應(yīng)建立基本的清洗程序,以保證實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)所用設(shè)備的清洗到位,濾膜也是干擾峰的來(lái)源之一。乙腈經(jīng)有機(jī)濾膜過(guò)濾后,梯度洗脫中會(huì)引入較大的干擾峰。由于色譜級(jí)試劑的生產(chǎn)廠家已經(jīng)過(guò)膜,而且大部分儀器都有脫氣裝置,所以建議無(wú)需過(guò)濾甲醇、乙腈等純有機(jī)相。流動(dòng)相瓶中引入干擾峰的現(xiàn)象主要發(fā)生在夏季,這是由于夏季氣溫高,純水相易滋生所致。后續(xù)流動(dòng)相瓶因用戶未正確清洗,導(dǎo)致引入干擾峰。因此,流動(dòng)相瓶的清洗應(yīng)建立嚴(yán)格的清洗程序。
  
  重新在島津液相色譜儀樣品預(yù)處理期間接觸的設(shè)備。預(yù)處理時(shí)接觸的設(shè)備主要有容量瓶、濾頭、注射器和注射瓶。容量瓶的清洗與流動(dòng)相瓶和過(guò)濾裝置的清洗相同。應(yīng)建立良好的清潔程序。輸液設(shè)備、濾頭和注射器多為塑料制品,其化學(xué)惰性比玻璃制品差,容易引入干擾峰。
  
  3、液相系統(tǒng)
  
  與前兩種干擾峰相比,液相系統(tǒng)的干擾峰更難求解。液相系統(tǒng)是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程,因此解決此類問(wèn)題的過(guò)程需要很長(zhǎng)時(shí)間,并且對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的色譜素養(yǎng)要求很高。此類問(wèn)題的來(lái)源可分為三類:強(qiáng)滯留物質(zhì)、離子對(duì)污染和管道滋生。
  
  一是強(qiáng)保留物質(zhì)的干擾,主要表現(xiàn)為寬峰。這些問(wèn)題大多出現(xiàn)在等度洗脫中,梯度洗脫主要出現(xiàn)在高比例的有機(jī)溶劑中。這是因?yàn)閺?qiáng)滯留物質(zhì)在本次注射中沒(méi)有被洗掉,而在隨后的注射中被洗脫出來(lái)。

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