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如果流動相均由液相色譜儀級溶劑組成,流動相沒有必要過濾。這是因為高效液相色譜級的有機溶劑,例如乙腈、甲醇等,在制造的工藝過程中都已經過了0.2μm微孔濾膜過濾。同樣,無論你是買的HPLC級的水還是在實驗室使用超純水凈化系統制備的水,最后一步也是通過0.2μm微孔濾膜,然而,如果有任何一種緩沖液中加入了固體物,例如,磷酸鹽,流動相過濾將是必要的一個步驟。
液相色譜儀雖然緩沖鹽可能是可溶解的、高純的,但它還是可能含有顆粒物質,例如在蓋試劑瓶的塑料內蓋時,塑料瓶蓋子與瓶口邊緣擠壓就會產生塑料顆粒。在這種情況下,添加的一種固體物可能*溶解了,但是少量雜質顆粒存在于流動相中成為殘渣。流動相通過0.45μm微孔濾膜過濾對于從流動相中除去所有顆粒物是一個有效方法。0.2μm微孔濾膜也可以用,但是它們就這個應用而言并不比0.45μm微孔濾膜更有效,而且它的過濾速度會更慢,特別是當實驗室使用的試劑和水的質量不太好時。
建議實驗室在編寫液相色譜儀制定他們流動相制備標準操作程序(SOPs)時規定,可以借鑒國際上同類實驗室的規定,即:流動相制備僅采用HPLC級液體時不需要過濾,反之所有流動相組成在使用前必須過濾。在連接儲液瓶和泵的輸液管的末端入口采用下沉式過濾器(常見材質有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種)也是很重要的。這個過濾器的規格為≥10μm的微孔物質,所以,它不能取代流動相過濾步驟,但是它能除去系統中的塵土并保證儲液瓶、輸液管使用的可靠性。
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