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HES分離紅細胞
閱讀：3059發(fā)布時間：2015-4-22
HES分離紅細胞
HES是從支鏈淀粉衍生出來的，是富含淀粉的復(fù)合物，其生理和化學(xué)特性主要由取代級、平均分子量決定。大量實驗表明平均分子量越大對紅細胞的凝集作用越強，有效提高血細胞的沉降速度，從而使血細胞與其它細胞分離。故而，使用HES沉淀法是一種的細胞分離方法。
間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 是指一群可向成骨細胞、成脂、肪胞、骨髓基質(zhì)細胞、肝臟細胞、心肌細胞和神經(jīng)細胞等多種細胞分化的多潛能組織干細胞,是在細胞治療、基因治療中有效發(fā)揮作用的理想工程細胞。 MSCs不僅存在于骨髓,也可從臍血、外周血中以及脂肪組織、肌肉、胎兒器官、大腦、牙齒中分離。UCB - MSCs的分離、篩選、增殖、分化與臍血樣本的選擇、培養(yǎng)基的差異以及分離、擴增分化過程中操作技術(shù)等多種因素有關(guān)。目前用于UCB - MSCs分離的方法有:貼壁篩選法、密度梯度離心法、流式細胞儀法和免疫磁珠法。流式細胞儀法對細胞損傷較大，免疫磁珠法價格相對較貴且由于抗原抗體反應(yīng)也容易改變細胞原有特性，而HES聯(lián)合密度梯度離心法常與貼壁篩選法結(jié)合使用,可提高所得UCB - MSCs的純度，目前研究多采用此法。國內(nèi)不少學(xué)者采用HES沉淀紅細胞，然后再進行離心分離單個核細胞，也取得不錯結(jié)果。實驗證明采用隨機數(shù)字表法，將每份臍血隨機分入兩個不同處理組，從而將臍血樣本的個體差異減小到zui小程度。結(jié)果證實，HES聯(lián)合密度梯度離心法獲得的有核細胞數(shù)量明顯多于FICOLL密度梯度離心法。
HES分子處在紅細胞之間聯(lián)接而成,同時還阻礙白細胞和內(nèi)皮細胞的黏附，并使平均血小板容積呈現(xiàn)微弱地降低，從而有輕度抑制血小板集聚的功能。臍血經(jīng)HES處理后，可使紅細胞沉積至試管底，對其它主要成分包括單個核細胞無影響。經(jīng)這樣處理后，實驗時間相對較短，步驟相對較少，細胞污染幾率小，從而使細胞數(shù)損失較少。結(jié)論證明，與相應(yīng)的干細胞分離液聯(lián)合分離使用HES沉淀法是一種的臍血單個核細胞分離方法。
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