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人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基 相關(guān)操作：

人間充質(zhì)干細胞復蘇

1.把人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基放入37°C水浴中預熱；
2.從液氮中取出間充質(zhì)干細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)孵育細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml的人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清,加入5ml的人間充質(zhì)干細胞*培養(yǎng)基重懸細胞，轉(zhuǎn)移到T-25細胞培養(yǎng)瓶中（帶濾芯）；
5.將培養(yǎng)瓶置于37℃，5% CO2的無菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

6.第二天，用新鮮的人間充質(zhì)干細胞*培養(yǎng)基給細胞換液。

人間充質(zhì)干細胞傳代培養(yǎng)

1.在顯微鏡下觀察細胞（細胞生長在中，且是次傳代），當細胞融合度超過80%時，即可傳代培養(yǎng)；

2.37℃水浴預熱培養(yǎng)基；

3.在超凈臺中，棄掉T-25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化細胞；

4.在顯微鏡下觀察到細胞變圓，有細胞開始脫離瓶壁時，即可加入5ml人間充質(zhì)干細胞*培養(yǎng)基終止消化；

5.用移液器輕輕吹打瓶壁上剩余的細胞，并輕輕吹打?qū)⒓毎瞪ⅲ?/span>

6.將細胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

7.棄上清,加入15-20ml的人間充質(zhì)干細胞*培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T-75細胞培養(yǎng)瓶中或按適當比例接種到T-25細胞培養(yǎng)瓶中（確保細胞貼壁后融合度在25-50%之間），細胞密度在1x104 cells/cm2 (2.5x105 cells/T-25  瓶），混合細胞懸液，確保細胞均勻分布；

8.將培養(yǎng)瓶置于37°C，5% CO2的無菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

9.每兩天用新鮮、預熱的人間充質(zhì)干細胞*培養(yǎng)基進行換液。

人間充質(zhì)干細胞凍存

間充質(zhì)干細胞凍存可用華雅思創(chuàng)的“無DMSO無血清細胞凍存液",具體操作如下。

1. 細胞消化和計數(shù)，用胰酶對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數(shù)；

2. 1000rpm離心5分鐘，去掉上清；

3. 根據(jù)細胞計數(shù)的情況，加入適量的凍存液，使細胞密度在1×106/ml左右（或根據(jù)自己希望達到的細胞密度）；

4. 輕輕地重懸細胞（務(wù)必重懸均勻），將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標記或者貼上標簽）中，旋緊凍存管蓋；

5. 將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃；

6. 第二天將細胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。

MSCGM-CD_（點擊看詳情）

英文名稱：TheraPEAK™ MSCGM-CD™ Mesenchymal Stem Cell Medium, Chemically Defined
產(chǎn)品應(yīng)用：人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)
中國俗稱：
：Lonza公司
規(guī)格型號：1 Kit

保存溫度：2～8 ℃, -80 ℃

MGro-500_（點擊看詳情）

【簡單介紹】產(chǎn)品應(yīng)用：人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)
中國俗稱：間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基
：美國StemRD公司
規(guī)格型號：500mL
保存溫度：2～8 ℃, -80 ℃

MSC SFM CTS_人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基（點擊看詳情）

【簡單介紹】英文名稱：StemPro® MSC SFM CTS™
價格：相信請參考咨詢上海華雅思創(chuàng)生物
產(chǎn)品應(yīng)用：
注冊品牌：Lifetechnologies
規(guī)格型號：1 kit
保存溫度：2～8℃

相關(guān)產(chǎn)品介紹：AIM-V® Medium CTS_SFM無血清培養(yǎng)基