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如何快速啟動siRNA文庫篩選
客戶：小刀，我之前有聽過你的siRNA文庫講座，還挺感興趣的
客戶：但是我們實驗室沒有高通量儀器，也可以做siRNA文庫篩選嗎？會不會太麻煩？
DAO：不會很麻煩，小幾十個基因的篩選排槍就能搞定，高通量儀器一般適用于幾百、幾千或幾萬個基因的篩選
客戶：之前沒做過siRNA篩選，我有點怕我操作不好
DAO：這個不用太擔心，基本的轉染操作和單基因一致，只不過通常是用96孔細胞板進行，所以需要多些細心和耐心
客戶：好的，那我可以試試看
客戶：對了，你講座中提到的成品文庫，我看了下，這些基因家族分類和我想要研究的方向不能夠完mei匹配呢
DAO：你說的是這些亞庫嘛？
DAO：這個問題不大，圖中所有文庫的基因列表我都有，你可以看看你的研究方向和哪套庫靠的上，然后挑選自己喜歡的基因進行定制。又或者你自己有想要研究的一些基因，可以直接發我，畢竟只要有5個基因就能定制文庫了，價格還劃算
客戶：能定制還蠻不錯的，那我來看看能不能湊些基因出來給你
客戶：但是定制的規格、產品形式又是什么樣的？是不是和成品不一樣啊？
DAO：基本是一樣的，但是定制更靈活：規格上有0.1, 0.25, 0.5, 1, 2 nmol 5種可選，siRNA你可以選擇4條分裝的，也可以選擇SMARTpool形式的
客戶：等等等，什么叫4條分裝，SMARTpool又是什么？
DAO：哈哈，講座沒認真聽吧，是這樣的，每個基因我們會提供4條不同的siRNA，4條分裝就是每條siRNA單獨放1個孔里，那SMARTpool就是把4條siRNA預混后共同放在1個孔里
客戶：那我要怎么選啊？哪種更合適呢？
DAO：做多個基因篩選的話，我是更建議選SMARTpool的，這樣你的轉染工作量就減少了3/4，而且SMARTpool沉默效果更好，畢竟4條不同的siRNA共同發揮作用，大哥不行還有二哥、三哥和四哥呢
客戶：那沉默效率怎樣？有沒有做過驗證啊？萬一效果不好怎么辦？
DAO：這個可以放心，所有的siRNA出廠前都有做過驗證，而且是有沉默效率保障的，保證每個基因對應的4條siRNA中至少有3條在mRNA水平上有≥75%的沉默效率，如果效果不好，提供陰陽性對照、siRNA的qPCR數據，廠家是會賠付的
客戶：OKK，那這個規格我咋選呢，我是想買個0.1nmol的，但是具體能做幾次篩選我有點慌？
DAO：和我想到一起去了，如果只是利用文庫做一下基因的初篩，那0.1nmol就很夠用了
DAO：關于能做幾次篩選，這個取決于你最終轉染時siRNA的使用終濃度了。以96孔板篩選，25nM終濃度，每個基因3個復孔為例，大概可以支持個10次篩選左右
客戶：這樣啊，那0.1nmol確實夠用了，篩到以后，我再單獨購買大規格的siRNA就是了，沒必要篩選的時候就買那么多，不劃算
DAO：對的，就是這個意思
客戶：行，那我了解了，我現在就去找找基因去，你把泛素化集合相關的基因列表發我，我看看選一些，再把我手頭上有的基因列一列，到時發你
DAO：好噠，這是基因列表，請查收
客戶：謝謝
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