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慢病毒載體由于能夠在分裂以及非分裂細胞中穩定的整合基因組，因此成為基因以及細胞治療中的一種有效工具。在過去的十幾年中慢病毒的生產以及純化技術已經獲得了顯著的進步，然而隨著市場規模的擴大，對慢病毒純化的通量以及純度的要求日益增長。對于各大企業來說，構建具有成本效益的生產以及純化平臺具有十分重要的意義。

但是目前慢病毒載體的純化方法和經驗多是由抗體藥的純化方法和經驗發展過來的，然而LVV的衣殼直徑較大，在80-100 nm左右，比一般的病毒大得多，它的大小也在純化方面帶來了挑戰，所以標準的基于樹脂的分離方法因LVV太大而不能達到足夠的效果，因此需要純化它們，需要使用不同類型的吸附劑。此外，此外，與AAVs等病毒相比，LVV往往更不穩定。LVV包膜在功能方面扮演著重要的角色，包括轉導和嗜性。但這一功能受到各種處理條件的負面影響，如溫度、pH、生物處理過程中液體的離子強度的變化。介于此，Astrea Bioseparations 的科學家，基于自身的純化和產品開發經驗，開發了專門針對病毒純化的Nereus 系列產品，目前最先推出的是針對慢病毒純化的LentiHERO.

下面就跟大家隆重介紹一下我們的這款慢病毒純化的產品--LentiHERO
Nereus LentiHERO™主要基于AstreAdept™基架和離子交換原理。

1.什么是AstreAdept™？
AstreAdept™是一種新型納米纖維材料，不同于傳統凝膠介質，它能通過快速的對流模式迅速捕獲大量的目的蛋白，使得工藝運行流速不再受限于凝膠孔徑大小。Astrea將這項技術整合到離心柱中，以將這些優勢帶到實驗室規模的病毒載體純化中。

2.Nereus LentiHERO™，5步離心快速慢病毒純化

無需昂貴設備，簡單幾步即可實現慢病毒的純化，配合真空設備，可實現多個樣品的同步處理。讓純化像DNA提取一樣簡單。

3.高動態結合載量
15%穿透時，每根離心柱的動態結合載量為1.9E+10

Nereus LentiHERO™小柱以20 mv/min的速度上樣，流穿收集在10mL液體中，使用p24 ELISA分析，基于上樣的總VP，計算VP穿透百分比

4.高回收率，無血清培養體系大于60%

有無血清培養體系慢病毒回收率：純化后樣品中慢病毒/病毒原液%。血清(-) n=3，血清(+)n=2

5.高效去除宿主蛋白殘留
減少95%的宿主細胞蛋白污染物
通過SDS-PAGE，洗脫液中檢測不到宿主細胞蛋白
宿主細胞蛋白大大減少，無論進樣中是否存在血清

6.功能、形態不受影響
重要蛋白，如Gag、編碼衣殼、基質和核衣殼的大小不受影響
用Nereus LentiHERO™純化的洗脫慢病毒的顆粒大小和形態不受影響
純化慢病毒顆粒的感染性不受影響

Western blot分析使用兔多克隆抗p24 IgG檢測LV特異性p24 Gag蛋白。LV洗脫物的兩個重復分析如泳道 1和 2所示。gag蛋白，如p24，在24 kDa左右被發現，另一個主要的gag蛋白p55在55 kDa左右。這種結果與截留分子量 (100kDa) 過濾法濃縮的LV相同 (數據未顯示)。

和同類產品比較在純度，得率和純化速率上面均有較大的優勢


Nereus LentiHERO™ 性能總結
① 基于新型納米復合纖維膜技術 - AstreAdept™ —— 賦能
② 易于使用的設計，實現功能性慢病毒顆粒的快速純化和高回收率
③ 宿主細胞蛋白質殘留去除95%以上
④ 同時處理多個樣品，降低病毒載體開發樣品制備的瓶頸
⑤ 實現10以上倍體積濃縮

通過助力研究人員加速細胞和基因療法的開發，該技術提供了一種更具成本和時間效益的方式，以加快向有需要的患者提供創新療法。

實驗室研發離心柱產品Nereus LentiHERO™已于9月29號美國BPI會議期間上市。研發設備配套AstreaAdept™技術解決基因和細胞治療領域工藝開發，小試以及生產規模的技術瓶頸。生產規模產品預計在2023年推出。

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