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桂寧（上海）實(shí)驗(yàn)器材有限公司
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酵母蛋白抽提試劑盒的優(yōu)勢(shì)有哪些？
2016-1-25 閱讀(2269)
用于提取酵母細(xì)胞中的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料的*新型材料，專(zhuān)一吸附DNA，可zui大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。若酵母蛋白抽提試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀，可在65度水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果。如果實(shí)驗(yàn)中的離心步驟出現(xiàn)柱子堵塞的情況，可適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間。酵母蛋白抽提試劑盒利用了氯化芐的這一特性，將植物樣品凍結(jié)融解后，再使用將植物樣品在壁上數(shù)次按壓即可破壞細(xì)胞壁。本法與傳統(tǒng)方法相比，省去了液氮研磨等煩瑣步驟，有利于一次性處理大量樣品。
酵母蛋白抽提試劑盒經(jīng)過(guò)了改良，熱處理時(shí)間只需15分鐘，使用其從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至水相回收只需30分鐘時(shí)間。得到的基因組DNA可以進(jìn)行PCR擴(kuò)增及限制酶處理等。依次加入生物素化的抗人CRP抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗人CRP抗體與結(jié)合在包被抗體上的人CRP結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入發(fā)光底物混合液，發(fā)光底物在辣根過(guò)氧化物酶的催化下發(fā)出熒光，用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測(cè)定化學(xué)發(fā)光值，CRP濃度與化學(xué)發(fā)光值之間呈正相關(guān)，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CRP的濃度。
