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有機肥蛔蟲卵死亡率如何檢測？
閱讀：1887 發布時間：2021-7-13肥料中蛔蟲卵死亡率的測定 GB/T 19524.2—2004
1 范圍
本標準規定了肥料中蛔蟲卵死亡率的測定方法。
2 測定方法原理
將堿性溶液與肥料樣品充分混合，分離蛔蟲卵，然后用密度較蛔蟲卵密度大的溶液為漂浮液，使蛔蟲卵漂浮在溶液的表面，從而收集檢驗。
3 試驗方法
3.1 儀器設備：騰宇儀有機肥檢測設備
3.2 試劑：騰宇儀專用試劑
3.3 檢驗程序：02
3.3.1 蛔蟲卵分離
稱取5.0～10.0g樣品（顆粒較大的樣品應*行研磨），放于容量為50mL離心管中，注入NaOH溶液25～30mL，另加玻璃珠約10粒，用橡皮塞塞緊管口，放置在振蕩器上，靜置30min后，以200～300r/min頻率振蕩10～15min。振蕩完畢，取下離心管上的橡皮塞，用玻璃棒將離心管中的樣品充分攪勻，再次用橡皮塞塞緊管口，靜置15～30min 后，振蕩10～15min。
3.3.2 離心沉淀
從振蕩器上取下離心管，拔掉橡皮塞，用滴管吸取蒸餾水，將附著于橡皮塞上和管口內壁的樣品沖入管中，以2000～2500r/min速度離心3～5min后，棄去上清液。然后加適量蒸餾水，并用玻璃棒將沉淀物攪起，按上述方法重復洗滌三次。
3.3.3 離心漂浮
往離心管中加入少量飽和NaNO3溶液，用玻璃棒將沉淀物攪成糊狀后，再徐徐添加飽和NaNO3溶液，隨加隨攪，直加到離管口約1cm為止，用飽和NaNO3溶液沖洗玻璃棒，洗液并入離心管中，以2000～2500r/min速度離心3～5min。
用金屬絲圈不斷將離心管表層液膜移于盛有半杯蒸餾水的燒杯中，約30次后，適當增加一些飽和NaNO3溶液于離心管中，再次攪拌、離心及移置液膜，如此反復操作３～４次，直到液膜涂片觀察不到蛔蟲卵為止。
3.3.4 抽濾鏡檢
將燒杯中混合懸液，通過覆以微孔火棉膠濾膜的高爾特曼氏漏斗抽濾。若混合懸液的渾濁度大，可更換濾膜。
抽濾完畢，用彎頭鑷子將濾膜從漏斗的濾臺上小心取下，置于載玻片上，滴加二、三滴甘油溶液，于低倍顯微鏡下對整張濾膜進行觀察和蛔蟲卵計數。當觀察有蛔蟲卵時，將含有蛔蟲卵的濾膜進行培養。
3.3.5 培養
在培養皿的底部平鋪一層厚約1cm的脫脂棉，脫脂棉上鋪一張直徑與培養皿相適的普通濾紙。為防止霉菌和原生動物的繁殖，可加入甲醛溶液或甲醛生理鹽水，以浸透濾紙和脫脂棉為宜。
將含蛔蟲卵的濾膜平鋪在濾紙上，培養皿加蓋后置于恒溫培養箱中，在28℃～30℃條件下培養，培養過程中經常滴加蒸餾水或甲醛溶液，使濾膜保持潮濕狀態。
3.3.6 鏡檢
培養10～15d，自培養皿中取出濾膜置于載玻片上，滴加甘油溶液，使其透明后，在低倍鏡下查找蛔蟲卵，然后在高倍鏡下根據形態，鑒定卵的死活，并加以計數。鏡檢時若感覺視野的亮度和膜的透明度不夠，可在載玻片上滴一滴蒸餾水，用蓋玻片從濾膜上刮下少許含卵濾渣，與水混合均勻，蓋上蓋玻片進行鏡檢。
3.3.7 判定
凡含有幼蟲的，都認為是活卵，未孵化或單細胞的都判為死卵。
3.3.8 結果計算
K=100(N1-N2)/ N1
式中：
K—蛔蟲卵死亡率（%）
N1—鏡檢總卵數
N2—培養后鏡檢活卵數