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土壤總磷/有機磷/無機磷含量檢測試劑盒說明書

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土壤總磷/有機磷/無機磷含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
規格: 50T/24S
試劑組成和配制:
試劑一:液體 50mL×1
瓶,4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用。
試劑二:液體 11mL×1
瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入 20 mL 蒸餾水,充分溶解后加入 10 mL
試劑二,混勻。
標準品:液體 1mL×1 支,40 μg/mL 無機磷標準品,4℃保存。
產品說明:
土壤總磷包括有機磷和無機磷,其中無機磷能夠直接被植物利用。土壤有機磷經過礦化分解而
轉化為無機磷。同時測定土壤總磷、有機磷和無機磷,可以全面反映土壤磷營養狀況。
利用鉬藍法定磷。取一份土樣,通過浸提法測定土壤無機磷含量;另外取一份土樣,經高溫灼
燒后,土壤有機磷轉化為無機磷,測得土壤總磷含量;總磷含量減去無機磷含量,即可計算出有機
磷含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調式水浴鍋,分析天平、可調式移液器、550℃高溫電爐,
1mL 玻璃比色皿、蒸餾水、100 目篩子(可更小)。
操作步驟:
一、土壤不同形態磷提?。?
1.
無機磷:稱取通過 100 目篩子的風干土樣 0.1g,轉移到
10 mL 離心管,加入 10mL 試劑一,
震蕩混勻,然后置于 45℃水浴 1h8000rpm,25℃離心
10min,取上清液一,用于無機磷含量
測定。
2.
總磷提?。喝⊥ㄟ^ 100 目篩子的風干土樣,550℃灼燒 1h,冷卻后稱取約 0.1g,轉移到 10 mL
離心管,加入 10mL 試劑一,震蕩混勻,然后置于 45℃水浴 1h,8000rpm,25℃,離心 10min,
取上清液二,用于總磷含量測定。
二、測定步驟:
1.
分光光度計預熱 30 min,調節波長到 660 nm,蒸餾水調零。
2.
打開水浴鍋,調節溫度到 40℃。
3.
空白管:取 EP 管,依次加入 500µL 蒸餾水,500μL 試劑三,混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,
室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,記為 A 空白管。
4.
標準管:取 EP 管,依次加入 50µL 標準液,450µL 蒸餾水,500μL 試劑三,混勻后置于 402頁,共 2
水浴保溫 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,記為
A 標準管。
5. 測定管:取
EP 管,依次加入 50µL 上清液一或者上清液二,450µL
蒸餾水,500μL 試劑三,
混勻后置于
40℃水浴保溫 10min,室溫冷卻 10 min 后于 660 nm
測定吸光度,記為 A
定管。
注意:空白管和標準管只需測定一次。
三、土壤磷含量計算:
1.
土壤無機磷含量(μg /g=[C 標準液×(A 測定管-A 空白管)÷(A
標準管-A 空白管)]×V
總÷W =400×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)÷W
C 標準液:40μg/mlW:土壤樣品質量,g;V 總:上清液一總體積,10 mL。
2.土壤總磷含量(μg /g=[C 標準液×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×V 總÷
W=400×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A
空白管)÷W
C
標準液:40μg/ml;W:土壤樣品質量,gV
總:上清液二總體積,10 mL。
3.
土壤有機磷(μg /g=土壤總磷-土壤無機磷
注意事項:
試劑三配制過程中,可能會產生黑色固體,其不影響結果,注意吸取時不要將黑色固體吸入。

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