神經肽 Y(Neuropetide NPY)是一種含有 36 個氨基酸殘基的多肽。廣泛分布于哺乳動物的中
樞神經系統。NPY 可收縮血管，升高血壓，對心臟表現為負性肌力作用。近有作者證實血小
板有合成 NPY 的能力。NPY 含量與應激反應程度有關，當出血性休克時，NPY 釋放增加對維
持全身血壓穩定和調節器官血流量具有重要的代償作用。研究各種病理狀態血漿及血小板 NPY
含量與釋放的改變及其病理生理意義，對心腦血管疾病的防治具有廣闊的研究前景。
測定盒組成：
1、緩沖液一瓶。
2、分離劑（第二抗體）一瓶。
3、NPY 抗體一瓶，用前加 ml 緩沖液稀釋。
4、NPY 標記一瓶，用前加 ml 緩沖液稀釋。
5、NPY 標準品五瓶：用前每瓶加 ml 緩沖液稀釋 33、100、300、600、1200pg/ml。
6、抑肽酶一瓶。
7、10%EDTA.Na2 一瓶。
樣品收集：
1、取靜脈血 3ml 注入含 10%EDTA.Na2 40ul 和抑肽酶 10ul（含 100U/ml 以上）的試管中，
混勻 4℃，3000 轉/分 離心 10 分鐘，分離血漿（溶血樣品影響測定結果）。如需要可分裝 2-3
份保存，放-20℃可保存 2 個月，在-70℃以下可存放半年。 測定前，使樣本置于室溫或冷水中
復融，再次 4℃，3000 轉/分 離心 5 分鐘，取上清測定。
2、組織樣品的處理：取出活組織，吸去血跡，稱重，放入 0.2mol/L 1N HAC 1ml 中，然后
在 100℃水浴中煮沸 10 分鐘，勻漿。4℃，3000 轉/分 離心 15 分鐘，取上清放-20℃以下保存，
測定時用 PBS 五倍以上稀釋，以調節 PH 值。另外，每種組織的樣品非特異結合（U 0 ）可能有
差異，每份標本單獨做一個 U 0 。取組織的重量視不同組織而異。
3、血漿樣品處理：實驗結果發現：有少數患者可能由于使用某些藥物或個體差異，出現血漿
蛋白對抗原抗體反應的影響，測定 NPY 值偏低，甚至為零。為排除樣品中蛋白質的干擾，可采
用簡易酸性乙醇提取法，
具體步驟如下：
取血漿 0.5ml+1ml 酸性無水乙醇（ 100ml 無水乙醇+冰乙酸 1.2ml），放振蕩器上振蕩 1min，4℃，
3500rpm/15min 離心 15min，將上清液倒入青霉素瓶，在 45℃水浴鍋上蒸干（可將水浴鍋溫
度調到 80℃左右，鍋口上放一鋁板，鋁板上溫度約 40~45℃，將青霉素瓶置于鋁板之上），大
約需 24 小時樣品可以*干燥，干燥后將青霉素瓶加蓋，封口，放-20℃保存。
測定前，每瓶加 PH7.4 PBS 0.5ml 溶解，混勻，倒入塑料管中，放-20℃ 4h 以上至樣品*
凍結，然后取出放置 4℃*溶解，取上清 200ul 測定用。
注：從 4℃取出后，一定要輕拿輕放，千萬不要再振蕩混勻，不要在室溫放置過久，zuihao現加現
取。