走近臺盼藍(lán)基本信息

中英文名稱：臺盼藍(lán)（Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍(lán)、曲利苯藍(lán)

分子式：C34H24N6O14S4Na4

分子量: 960.82

可溶于水（10mg/ml)

臺盼藍(lán)是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性。還常用于檢測細(xì)胞是否存活。活細(xì)胞不會被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會被染成淡藍(lán)色。

臺盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬，故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。

走近臺盼藍(lán)染色液機(jī)理

正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍(lán)，使之不能夠進(jìn)入胞內(nèi)；而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞，胞膜的通透性增加，可被臺盼藍(lán)染成藍(lán)色。通常認(rèn)為細(xì)胞膜完整性喪失，即可認(rèn)為細(xì)胞已經(jīng)死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍(lán)染色可以非常簡便、快速地區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。臺盼藍(lán)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中zui常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。注意凋亡小體也有臺盼藍(lán)拒染現(xiàn)象。

臺盼藍(lán)染色后，通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較的定量。

臺盼藍(lán)染色只需3-5分鐘即可完成，并且操作非常簡單。

臺盼藍(lán)染色液操作步驟

步驟：(來自supergama)

1、4%臺盼藍(lán)母液：稱取4g臺盼藍(lán)，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100ml，用濾紙過濾，4度保存。使用時(shí)。用PBS稀釋至0.4%。（也可買Gibco的成品）;

2、胰酶消化貼壁細(xì)胞，制備單細(xì)胞懸液，并作適當(dāng)稀釋。

3、染色：細(xì)胞懸液與0.4%臺盼藍(lán)溶液以9:1混合混勻。（終濃度0.04%）

4、計(jì)數(shù)：在三分鐘內(nèi)，分別計(jì)數(shù)活細(xì)胞和死細(xì)胞。 1 e7 e* I* S) ^% X8 U$ K- _

5、鏡下觀察，死細(xì)胞被染成明顯的藍(lán)色，而活細(xì)胞拒染呈無色透明狀。

6、統(tǒng)計(jì)細(xì)胞活力：活細(xì)胞率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×100%

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