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挑戰性液體如何精準移液？
以高準確度和精度重復進行揮發性、粘性、起泡和油性液體移液相當具有挑戰性。由于這些液體的固有特性，它們可能會粘在塑料上或滴漏。這些挑戰只需遵循良好移液實踐和考慮液體的具體特性即可克服。
在本實用指南中，我們提供了一些建議，幫助您選擇配有兼容移液器吸頭的合適移液器，以及針對困難液體的正確移液技術。
應該選擇哪種移液器？
為獲得盡量準確和可重復性結果，請選擇標稱容量（最大容量）接近移液量的移液器。圖1顯示了使用賽多利斯Picus® 50-1,000μL 移液器和5 - 120μL 移液器進行的兩組100μL 乙醇移液操作。對于Picus® 5 - 120μL 移液器，當操作者、移液模式（反向移液）和移液技術（預潤洗循環次數）保持不變時，可獲得更好的準確度和再現性。
圖1.在最大容量時，移液的準確度和再現性最好
在反向移液中，吸液量超過目標體積。將柱塞壓到第一個停止位置后，排出總目標體積，多余的量會留在吸頭中。多余的量可返回吸頭中繼續使用，也可通過將柱塞壓到第二個停止位置來廢棄吸頭中的多余液體。在某些情況下，存在余量對移液性能有明顯好處，例如移液揮發性或粘性液體時。這些移液技術之間的差異如圖2所示。
圖2.基本移液模式圖解 A.正向移液 B.反向移液
電動移液器提供額外移液技術，有助于減少移液的差異和時間。其中包括多次分液、多次吸液、稀釋和滴定等。
應該用哪種移液技術？
正向移液和反向移液是手動移液器可使用的兩種基本移液模式。基本的良好操作包括將液體吸入吸頭時保持移液器直立（0° 角）狀態，將液體排液到目標容器時將移液器稍微傾斜（30-45° 角）。
圖3A顯示了移取1,000μL水時的吸液角度對準確度的影響。隨著吸液角度的增加，實際移液量幾乎呈直線增加。圖3B顯示了使用反向移液技術排液時，將移液器保持在0°角而非45°角對準確度和精度的負面影響。反向移液1,000μL 水時，將移液器保持在45°角可獲得更精準的結果。
圖3.吸液和分液角度對準確度和精度的影響
如何應對液體從移液器吸頭滴落？
如果液體從移液器吸頭滴落，應首先確保吸頭正確密封在移液器的吸頭圓錐上。圖4顯示了使用不同制造商的移液器吸頭時的移液性能差異。
圖4.吸頭和移液器：兼容性很重要
注：不同移液器吸頭與Tacta® 10 μL 移液器結合用于測量10 μL。每個數據點代表用同一移液器吸頭進行的10 次測量。每種顏色對應一個移液器吸頭品牌，其中“A” 為賽多利斯移液器吸頭，“B-E” 為其他制造商吸頭。一個品牌內的數據點之間的分布顯示了同一吸頭盒內的各吸頭間的差異。
如果在轉移揮發性液體以外的其他液體時有大量泄漏的情況，請檢查移液器吸頭圓錐是否干凈；使用無紡布和合適的清潔劑（如乙醇）將其擦拭干凈。檢查吸頭圓錐或活塞和套筒之間的密封件有無損壞。
揮發性液體
移取揮發性液體和溶劑（如乙醇、丙酮或乙腈）時，從移液器吸頭滴落是常見現象。為避免滴落，請預潤洗吸頭，反向移液更有助于改善滴漏情況。
圖5A顯示了在處理乙腈時，無預潤洗的正向移液和適當預潤洗的反向移液之間的差異。同樣的建議適用于任何容量，如圖5B 所示。
圖5.移取揮發性液體
粘性液體
緩慢的吸液和排液速度至關重要，因此實現粘性液體的可靠移液其實只需適當的技術和耐心。反向移液可提高準確度。還需注意的是，請勿將吸頭浸入液體太深。此外，吸液時，移液器吸頭應在液體中多浸幾秒鐘，因為這樣將使液體足以全部吸入到吸頭中。排液時，建議將吸頭抵住目標容器壁，使液體附著在目標容器上。寬口吸頭也可用于促進液體流動，尤其是在溶液中有顆粒的情況下。
圖6顯示了采用反向移液和Optifit 寬口吸頭移取1,000μL甘油與采用正向移液和標準Optifit 吸頭移取1,000μL 甘油的差異。
Picus® Nxt 移液器在用戶認為有幫助的情況下，可通過正向移液進行重復吹出。
圖6. 移取粘性液體
油類
與正向移液相比，反向移液油的排液更準確，再現性更好。
在圖7中，使用賽多利斯Tacta® 10-100μL 手動移液器移取丁香酚。
圖7. 油類移液
泡沫液體
含清潔劑或蛋白質的液體容易起泡。處理這些液體時，必須緩慢移液并使用反向移液技術。
移液器應多久維護一次？
經常清潔移液器是一種良好操作。每天擦拭外部和吸頭圓錐可減少交叉污染機率，并確保正確吸頭密封。清潔移液器下端內部可去除積聚的灰塵，這有助于活塞密封并保持較低的操作力。清潔還有助于發現移液器是否因溶劑或蒸汽而老化，以免影響結果。
請記住，無論何時拆裝下端，最好在分析天平上檢查移液器性能，確認組裝正確，無任何東西阻礙活塞的完全密封。
建議移液器的最長維護間隔時間為一年。但應根據移液頻率、已移液的液體以及移液器的使用年限和型號等因素來調整間隔時間。校準應至少每年進行一次，或根據使用頻率每3 - 6 個月進行一次。更換移液器零件（如吸頭圓錐或活塞）后，還應進行校準；現場高壓滅菌后，只需進行性能檢查。
總結
移液技術在獲得理想結果方面具有核心作用。移取具有挑戰性液體時，學會利用反向移液非常有用。良好實踐是始終首先考慮液體，并相應采取移液操作。
表1總結了各種液體的建議移液技術。
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