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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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翌圣生物革新力作!超低dsRNA T7 RNA聚合酶,開啟mRNA合成新紀(jì)元

2025-3-7  閱讀(160)

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在mRNA療法的快速發(fā)展中,高效、安全的mRNA合成技術(shù)是實現(xiàn)臨床突破的核心。然而,傳統(tǒng)T7 RNA聚合酶在mRNA體外轉(zhuǎn)錄(IVT)過程中常產(chǎn)生dsRNA副產(chǎn)物,這不僅會觸發(fā)不必要的免疫反應(yīng),還會干擾mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率,成為mRNA療法發(fā)展的關(guān)鍵瓶頸。  

 

為攻克這一難題,翌圣生物憑借其的ZymeEditor定向進化平臺,成功開發(fā)出新一代低dsRNA T7 RNA聚合酶。該產(chǎn)品通過創(chuàng)新性技術(shù),從根本上抑制dsRNA的生成,同時保持高產(chǎn)量、高完整度和高效加帽率,為mRNA療法的安全性和有效性提供了保障。

 

01
 

高效低dsRNA合成

  • dsRNA含量顯著降低:與傳統(tǒng)T7 RNA聚合酶相比,dsRNA含量降低了至少10倍以上,有效避免了dsRNA引發(fā)的免疫激活和對mRNA功能的干擾。

  • 高產(chǎn)量:mRNA產(chǎn)量穩(wěn)定在9mg/mL以上,滿足大規(guī)模生產(chǎn)的需要。

  • 高完整度:轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的完整度不低于野生型T7 RNA聚合酶,確保mRNA的質(zhì)量和功能。

 

02
 

高效加帽與低投入

  • 高加帽率:片段加帽率均超過99%,確保mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率。

  • 低Cap analog投入量:在不同片段長度下,Cap analog投入量降低至2.5mM,仍能實現(xiàn)優(yōu)異的加帽率,顯著降低了生產(chǎn)成本。

 

03
 

優(yōu)化的篩選與驗證

  • 雙重篩選策略:通過構(gòu)建隨機文庫與FADS高通量篩選方法,以及半理性設(shè)計與微孔板技術(shù),篩選出超過10^6的隨機突變文庫,最終選出一款突變體進行商品化應(yīng)用。

  • 全面性能驗證:在不同長度的應(yīng)用場景下,與野生型T7 RNA聚合酶及競品相比,dsRNA含量顯著降低,同時保持了高產(chǎn)量、高完整度和高加帽率。

 

04
 

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

片段長度

T7 RNA pol

產(chǎn)量(mg/mL)

完整度(%)

dsRNA含量((1ug RNA產(chǎn)生 ng的dsRNA)

4K

野生型T7

12.4

88.3

0.4273

dsRNA T7

12.1

89.9

0.0129

Company-A

11.0

87.8

0.0323

9K

野生型T7

9.5

81.9

2.9180

dsRNA T7

9.0

82.0

0.0379

Company-A

7.2

78.7

0.1805

Cap analog投入量(mM)

加帽率(%)-4K

1K

野生型T7

dsRNA T7

野生型T7

10

100%

100%

100%

5

100%

100%

100%

2.5

100%

100%

99.7%

 

04
 

知識產(chǎn)權(quán)與產(chǎn)品信息

翌圣生物的這項創(chuàng)新性研究成果已發(fā)表于公開文章《FADS and semi-rational design modified T7 RNA polymerase reduced dsRNA production, with lower terminal transferase and RDRP activities》,并已向中國、美國提交了申請(國內(nèi)已授權(quán),美國正在申請中)。

 

通過低dsRNA T7 RNA聚合酶的創(chuàng)新開發(fā),翌圣生物不僅為mRNA療法的安全性和有效性提供了有力保障,更為mRNA技術(shù)的發(fā)展注入了新的活力,助力mRNA療法在全球范圍內(nèi)的廣泛應(yīng)用。

 

04
 

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

CleascripTM T7 RNA Polymerase GMP-grade (low dsRNA, 250 U/μL)

10629ES10/60/86/96/99

10KU/100KU/2500KU/25MU/100MU



 


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