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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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一文看懂鼠尾膠原蛋白

2024-4-22  閱讀(288)

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膠原蛋白(Collagen)是一種高分子功能性蛋白質(zhì),也是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分,比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富;II型膠原在透明軟骨中含量豐富;III型膠原在皮膚、血管內(nèi)膜、腸道中含量豐富,彈性較好。不同類型的膠原蛋白在醫(yī)療、美容、醫(yī)學(xué)和科學(xué)研究領(lǐng)域有著重要的應(yīng)用。


 

其中I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成300 nm長(zhǎng)的異源多聚體。當(dāng)用作凝膠時(shí),膠原蛋白有助于體外培養(yǎng)并增強(qiáng)細(xì)胞特異性形態(tài)和功能的表達(dá)。翌圣生物生產(chǎn)的I型鼠尾膠原蛋白來源于天然小鼠鼠尾巴和SD大鼠鼠尾巴,制作的膠原蛋白產(chǎn)品溶于0.02M HAc溶液,無菌包裝。可用于薄層以促進(jìn)附著,應(yīng)用包括研究腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移,單核細(xì)胞,巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)或分化研究,以及粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的放射自顯影研究,以及維持肝細(xì)胞功能,分化狀態(tài)和肝細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄水平的升高等研究。

 

膠原蛋白的生產(chǎn)方式(來源:開源證券)

 

翌圣生物提供來自于大鼠和小鼠尾的I型膠原蛋白,不僅產(chǎn)量足、純度高、蛋白濃度豐富,品質(zhì)更佳,且經(jīng)過具體的應(yīng)用驗(yàn)證,得到結(jié)果與預(yù)期一致。

 

 

 

生產(chǎn)質(zhì)控

 
  • 無塵車間內(nèi)生產(chǎn),保證潔凈度;

  • 來源小鼠和SD大鼠鼠尾巴;

  • 單批產(chǎn)量達(dá)3L,滿足大規(guī)模使用需要;

  • 通過細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試(包括三維膠細(xì)胞培養(yǎng));

  • 電泳結(jié)果蛋白濃度>90 %(SDS-PAGE);

  • 產(chǎn)品為無菌溶液,無支原體污染。

 

 

 

應(yīng)用方法

 
01

薄層包被程序

【注意】:包被濃度為5-10 µg/cm2,推薦濃度選5 µg/cm2。建議根據(jù)具體的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化。

 

1)膠原蛋白I用0.02 M乙酸稀釋配置50 μg/ mL工作液,膠原蛋白I不溶于中性pH溶液;

2)以5 µg/cm2涂布培養(yǎng)皿,例如:35 mm的培養(yǎng)皿的表面積約為10 cm2,1~2 mL的工作液足以覆蓋此皿;

3)室溫孵育1小時(shí);

4)小心吸取剩余溶液,用PBS或無血清培養(yǎng)基洗滌以除去多余乙酸;

5)組織培養(yǎng)皿包被后可立即使用,也可風(fēng)干,在2-8℃無菌條件下可貯存長(zhǎng)達(dá)一周。

 

02

膠凝程序

膠原蛋白I按以下步驟使其pH達(dá)到弱堿性時(shí)凝膠

 

1)將無菌5 cm左右的紗布海綿貼在150 mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和,把蓋子放在150 mm的培養(yǎng)皿上,暫放置一邊;

2)將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上,厚度可以根據(jù)需要改變,膠原蛋白I(50-100 μL)足以涂覆22 mm的蓋玻片。對(duì)于直徑100 mm的培養(yǎng)皿,每個(gè)加入約6 mL; 對(duì)于60 mm培養(yǎng)皿添加約2.3 mL,對(duì)于35 mm培養(yǎng)皿添加約1 mL;

3)將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘;

4)在無菌蒸餾水中(35 mm培養(yǎng)皿加5 mL等)浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30 min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0 mL無菌蒸餾水,放置在層流罩中過夜;

5)吸出蒸餾水,用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。

 

圖.mcf-7細(xì)胞鼠尾膠原包被處理和未包被處理對(duì)比結(jié)果

 

圖.NIH-3T3細(xì)胞在三維膠原中生長(zhǎng)的結(jié)果

 

 

 

產(chǎn)品訂購(gòu)

 

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾膠原蛋白I (大鼠尾)

40125ES10/50

2/10 mL

Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail鼠尾膠原蛋白I型(小鼠尾)

40136ES10/50

2/10 mL

 

相關(guān)產(chǎn)品

 

類型

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

應(yīng)用方向

 

基本濃度

8-12 mg/ml

40183

Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠

適應(yīng)于2D和3D培養(yǎng)、侵襲和遷移實(shí)驗(yàn),也可以用于體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)

40184

Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

主要應(yīng)用于需要顏色檢測(cè)如熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)等

 

高濃度

≥18mg/ml

40187

Ceturegel® Matrix High Concentration,LDEV-Free 基質(zhì)膠

 

主要應(yīng)用于如血管生成、凝膠栓塞和體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)(對(duì)于血管生成建議基質(zhì)膠終濃度要≥10mg/ml)

40189

Ceturegel® Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

40188

Ceturegel® Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

 

 

低生長(zhǎng)因子

40185

Ceturegel® Matrix GFR,LDEV-Free 基質(zhì)膠

 

主要是排除生長(zhǎng)因子對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾。應(yīng)用于與生長(zhǎng)因子、信號(hào)通路等相關(guān)研究。無酚紅的也用來做類器官培養(yǎng)

40186

Ceturegel® Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

干細(xì)胞用

40190

Ceturegel® Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free 基質(zhì)膠

主要用于如hESC,iPSC等干細(xì)胞培養(yǎng)

類器官用

40191

Ceturegel® Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free 基質(zhì)膠

類器官培養(yǎng)專用基質(zhì)膠



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