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TA克隆建庫技術(shù)是目前商業(yè)化建庫的主流方式，通常需要片段化、末修加A、接頭連接、PCR擴(kuò)增等實驗流程，操作復(fù)雜，且建庫周期長。與TA克隆建庫技術(shù)相比，轉(zhuǎn)座酶法建庫在DNA片段化的同時給DNA片段加上測序接頭，可替代TA克隆中的片段化、末修加A、接頭連接步驟，在后續(xù)建庫擴(kuò)增過程中，一步法PCR建庫就能獲得完整的用于測序的文庫，具有操作簡便、極大縮短建庫時長等優(yōu)點。
圖1. 基于Tn5酶的建庫流程
Tn5酶作為轉(zhuǎn)座酶法建庫的核心酶原料，在NGS領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛，除了應(yīng)用于DNA建庫外，還可應(yīng)用于快速RNA建庫、ATAC、CUT&Tag、單細(xì)胞測序等技術(shù)。（點擊查看詳情）
翌圣ZymeEditor™酶改造平臺精心打造轉(zhuǎn)座酶系列產(chǎn)品：Tn5 Transposase（Cat#14524ES）、pA-Tn5 Transposase（Cat#14528ES）、pG-Tn5 Transposase（Cat#14530ES）以滿足不同應(yīng)用需求。
1、5 U投入量無核酸外切酶殘留
圖2.pG-Tn5 Transposase核酸外切酶殘留檢測
2、相同酶投入量下，片段化能力優(yōu)于其它品牌
圖3. pG-Tn5 Transposase片段化能力檢測
3、應(yīng)用于CUT&Tag建庫產(chǎn)量更高
分別使用翌圣及品牌A相同酶量的pG-Tn5 Transposase對1000個細(xì)胞投入量樣本建庫，并對文庫測序后的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示翌圣pG-Tn5 Transposase文庫產(chǎn)量高于品牌A（圖4A），Mapping率相當(dāng)（圖4B）; 染色質(zhì)上的信號分布情況與品牌A一致（圖5）。
圖4. pG-Tn5 Transposase應(yīng)用于CUT&Tag的文庫產(chǎn)量及Mapping率
圖5. pG-Tn5 Transposase應(yīng)用于CUT&Tag在染色質(zhì)上的信號分布
應(yīng)用 | 定位 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 |
轉(zhuǎn)座酶建庫ATAC建庫
| Tn5單酶 | Tn5 Transposase | 14524ES |
建庫試劑盒 | Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina®(for 50 ng) | 12207ES | |
CUT&Tag建庫
| pA-Tn5單酶 | pA-Tn5 Transposase | 14528ES |
pG-Tn5單酶 | pG-Tn5 Transposase | 14530ES | |
建庫試劑盒 | Hieff NGS® G-Type In-Situ DNA Binding Profiling Library Prep Kit for Illumina | 12598ES |
翌圣ZymeEditor™
酶改造定制服務(wù)
翌圣ZymeEditor™是一個酶改造底層技術(shù)平臺，它基于翌圣生物多年在分子酶改造領(lǐng)域中的技術(shù)積累與知識拓展，該平臺已具備對多種酶的多種需求進(jìn)行定向改造的能力。因此，ZymeEditor™平臺從2023年開始正式推出酶改造對外定制服務(wù)，可為各種應(yīng)用領(lǐng)域（如醫(yī)藥、診斷、食品、化工等）的客戶提供全套酶改造服務(wù)，也可以單獨提供蛋白發(fā)酵及純化工藝開發(fā)優(yōu)化、規(guī)模化生產(chǎn)服務(wù)，以滿足不同客戶的需求，助力產(chǎn)業(yè)升級。
圖6.ZymeEditor™酶改造定制服務(wù)流程
