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Hieff NGS® MaxUp II Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina

2020-6-12  閱讀(456)

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Hieff NGS® MaxUp II Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina

——兼容常規與鏈特異性mRNA文庫構建


背景簡介
RNA被認為是生物信息傳遞的“橋梁”。而轉錄組測序可利用NGS技術對組織或者細胞中的RNA反轉錄之后的cDNA文庫測序,通過分析可計算不同RNA的表達量、發現新的轉錄本、進行轉錄本定位、分析可變剪切、檢測基因融合等,提供全面的轉錄組信息。

圖 遺傳學中心法則
 

目前主流的mRNA建庫主要流程是mRNA純化,mRNA逆轉錄,雙鏈cDNA合成,末端修復,A尾添加,接頭連接,純化/分選,文庫擴增,時間上需要1.5 d甚至更久。
翊圣生物結合自身多年的分子酶創新研發經驗,推出升級版快速mRNA建庫試劑盒,可在短的時間進行高效建庫。助力獲得優異的轉錄組測序數據。

亮點一覽
1、建庫快速:完整建庫比主流方法縮減1.5-2 h,1 d內獲得高質量文庫。

圖 升級版建庫試劑盒建庫流程
 

2、兼容常規與鏈特異性文庫構建
本產品搭配兩種二鏈合成buffer,即含dNTP(常規建庫)與dUTP(鏈特異性建庫),可兼容兩種模式的mRNA文庫構建。一個盒子兩種用處,不用再額外備貨。

3、高效逆轉錄酶,更適合復雜模板
RNaseH能特異的降解RNA-DNA雜交分子中RNA的特性,將RNA降解成小片段,影響反轉錄效率。YEASEN提供的第四代Hifair逆轉錄酶,去除RNase H活性,同時溫度的耐受性高達65℃,有利于復雜RNA模板二級結構的打開,更利于逆轉錄的進行。


硬核支撐
以1 μg的標準品RNA(Agilent#740000)為起始,分別構建鏈特異性文庫和非鏈特異性文庫,質控后的文庫用illumina Hiseq X-10 PE150測序。

  1. 優異的測序質量


 

  1. 表達重復性高


 

  1. 優異的文庫均一性


 

  1. rRNA殘留更低,有用數據更多


 

 

  1. 鏈特異性建庫:98.5%的Reads比對到正義鏈上


 

客戶案例
單位:廣州某生物公司J*
樣本:草莓,油菜,核盤菌
結論:高質量文庫,優異的測序數據

  1. 文庫報告


 

  1. 測序質量


 

  1. 數據比對


 

  1. 數據分布


 

  1. 基因覆蓋度分析


 

單位:上海某生物公司O*
樣本:人,大鼠,西瓜
結論:高質量文庫,優異的測序數據

  1. 建庫報告


 

  1. 測序質量


 

  1. 數據比對


 

  1. 數據分布


 

  1. 基因覆蓋度分析


 

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類型名稱貨號規格
建庫試劑盒Hieff NGS® MaxUpⅡ Dual mode mRNA Library Prep Kit for Illumina®12300ES24/9624/96 T
mRNA富集磁珠Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit12603ES24/9624/96 T
rRNA去除試劑盒Hieff NGS® MaxUp rRNA Depletion Kit (Human/Mouse/Rat)12253ES24/9624/96 T
RNA純化磁珠Hieff NGS® RNA Cleaner12602ES56/7560/450 mL

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