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技術文章

上海滬鼎全面解析重復性差的原因

閱讀:1282          發布時間:2015-11-3

       在elisa實驗中新手朋友由于各種的原因重復性會差,上海滬鼎的錢為您詳細整理了重復性差的9大因素:

1、樣品數量不一,加樣時間長短不一重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近
2、樣品加入后未混勻加樣后在混勻器上充分混勻
3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對TMB顯色用450/630波長
4、酶標儀測定重復性差校對酶標儀
5、洗滌不正確洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下,垂直用力甩凈內容物(可多甩幾次),在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔,洗滌應充分
6、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱)恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應控制在37℃
7、不慎多加或少加酶或顯色劑多加時顯色深,少加則淺,用記號筆圈上,便于分析
8、閾值附近時陰時陽同一樣品做三個復孔,以二個(含二個以上相同結果為準)
9、加樣量不足、保溫時間、洗滌條件一致盡可能使用同一移液器和裝緊吸嘴重復測定標本。條件、人員等應盡量與上次保持一致

     希望經過以上的分析能使您避開這些問題,能成功的做出的實驗! 

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