成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海滬鼎生物科技有限公司>技術(shù)文章>ELISA雙抗體夾心法及間接法的正確操作步驟

技術(shù)文章

ELISA雙抗體夾心法及間接法的正確操作步驟

閱讀:6601          發(fā)布時(shí)間:2013-3-25

ELISA雙抗體夾心法及間接法的正確操作步驟
elisa試劑盒原理
  ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。   
操作步驟
     方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
  方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:   
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
4. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
5. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
高品質(zhì),試劑盒盡在上海滬鼎生物!更多產(chǎn)品咨詢請(qǐng)我司業(yè)務(wù)員。

收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對(duì)比框

產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話 二維碼 意見(jiàn)反饋 在線交流

掃一掃訪問(wèn)手機(jī)商鋪
18221656311
在線留言
主站蜘蛛池模板: 大香蕉伊人成人网| 美女扒开尿道让男人捅| 国产麻豆日韩欧美久久| 亚洲最大成人网站| 午夜爱爱免费视频体验区| 欧美性videosxxxxx| 欧美搡BBBBB搡BBBBB| 欧美AAAAAA级午夜福利视频| 韩国理论片漂亮的小峓子| 男人天堂最新在线| 香港三日本三级少妇三级66| 大香伊蕉在人线视频777| 色综合91久久精品中文字幕| 国产三级在线免费观看| 曰韩免费一级片| 精品久久久无码人妻中文字幕边打电话| 国产精品麻豆一区| 中文字幕亚洲国产欧| 大学生一级毛片免费看**| 中文字幕亚洲精品日韩| 耽肉高h喷汁呻吟| 久久久精品日韩免费观看| 91色老头国产熟女精品| 欧美一级片日韩一级片| 日本韩国欧美一级片| 亚洲一区日韩一区欧美一区a| 欧美午夜精品久久久久久浪潮| WWW亚洲精品少妇裸乳一区二区| 少妇人妻综合久久中文字幕| 中文日韩欧美一区二区三区| 国产麻豆精品精东影业AV网站| 特级淫片aaaa毛片aa视频| 王梅乱LUN第5部分| 97精品人人A片免费看| 孕妇被男狂揉吃奶胸高潮| 色琪琪丁香婷婷综合久久| 欧亚成年男女深夜百度网盘| 乱公和我做爽死我了A片| 国产一区二区三区美女| 被色情系统肉到哭H| 国产美女久久久久久久久久久|