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技術文章

金黃地鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒使用說明書

閱讀:1225          發布時間:2021-2-23

一、金黃地鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒使用說明書”詳細參數

【檢測方法】:酶聯免疫法/酶免法(ELISA)

【產品性狀】:96T/48T,盒裝液體(兩種統一規格)

【貯藏條件】:2-8°C

【產品有效期】:6個月,我公司Elisa試劑盒均為新批次,可放心購買。

【產品主要成分】:酶標板,試劑,標準品等。

【種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

【產品單價】(具體折扣咨詢),可免費代測,含稅含運費。

【標本】血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等

注:標本必須為液體,不含沉淀。

二、四大特性

1.特異性強:不與其它細胞因子反應。

2.重復性好:板內、板間變異系數均小于10%。

3.穩定性高:實驗效果很穩定。

4.超靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品,稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

三、具體操作方法

以雙抗體夾心法為例展示:

1、雙抗體夾心法檢測抗原         

操作步驟如下:

1)將特異性抗體與固相載體結合,形成固相抗體。洗滌除去尚未結

合的抗體及一些雜質。

2)加入待測標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。

3)加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。

4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原,例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標所使用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步檢測。

在一步法測定中,當標本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成"夾心復合物"。類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象,此時反應后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標準曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同,如按常法測讀,所得結果將低于實際的含量,這種現象被為鉤狀效應(hook effect),因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應嚴重時,反應甚至可不顯色而出現假陰性結果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等)時,應注意可測范圍的高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應。

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