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技術文章

ELISA試劑盒試驗的標準曲線和測定的重復性差的原因

閱讀:1918          發布時間:2020-3-31

    在ELISA試劑盒實驗中常見原因如下:
    a)可能原因:加樣本及試劑量不準;孔間不一致;
    解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密。
    重復某一樣品時,加樣時間盡可能與在次接近;
    重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應充分混勻。

    b)可能原因:加樣過快,孔間發生污染;
    解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過快。  
      
    c)可能原因:加錯樣本;
    解決方法:檢查記錄和試劑,是否加錯樣本。

    d)可能原因:加樣本及試劑時,加在孔壁上部非包被區;
    解決方法:加樣槍頭不要貼壁。

    e)可能原因:不同批號試劑盒中組分混用;
    解決方法:不同批號試劑盒中組分不可混用。

    f)可能原因:溫育時間、洗板、顯色時間不一致;
    解決方法:檢查時間是否一致。

    g)可能原因:孔內污染雜物;
    解決方法:離心樣品,排除雜物。

    h)可能原因:試劑/樣品沒有混勻;
    解決方法:充分混勻樣品和試劑。

    i)可能原因:血清標本未*凝固即加入,反應孔內出現纖維蛋白凝固或殘留血細胞,易出現假陽性反應等。
    解決方法:待血清標本*凝固后做試驗。

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