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技術文章

干貨-試劑盒好壞的鑒別方法

閱讀:2471          發布時間:2019-7-30

    Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。但是試劑盒的好壞卻關系到整個實驗的結果。那就看看滬鼎技術怎么講:

鑒別方法:
 Ⅰ. 利用干擾實驗即可辨別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:

 

(1)將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液
 

(2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
 

(3)后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物
 

(4)實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
 

(5)如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

 

Ⅱ.如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
 

(1)取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
 

(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。
 

(3)另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。
 

(4) 后續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
 

(5)實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
 

(6)如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
   

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