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跳孔？滬鼎為您解析關(guān)于Elisa跳孔相關(guān)問題
閱讀：2098 發(fā)布時間：2019-7-26
跳孔（Drift）在做科研實驗時有沒有發(fā)現(xiàn)，很多elisa試劑盒實驗因為跳孔而出現(xiàn)倒置現(xiàn)象。其實跳孔的定義是酶標(biāo)板從左側(cè)到右側(cè)的孔或從上到下的孔內(nèi)信號出現(xiàn)顯著的倒置現(xiàn)象 ，以下上海滬鼎根據(jù)售后指導(dǎo)列出幾個客戶常見問題給予解答。如您有類似情況發(fā)生，歡迎參考閱讀。
我剛配置試劑的時候中斷了，這是否會影響我的實驗結(jié)果？
◆ 這可能會導(dǎo)致產(chǎn)生波動的曲線。在移液之前確定所有的標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品是否配制完好。請在試劑配制完的15-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。（除非特別說明）
我是否需要一個多道移液器？
◆ 在配制諸如底物，酶結(jié)合物，或者稀釋液的時候，*hao選擇連續(xù)或多道移液器。
如果我沒有平衡試劑會怎樣？
◆ 沒有平衡的試劑會導(dǎo)致孔之間溫度不均，使整個酶標(biāo)板的信號產(chǎn)生變異。除非特別說明，試劑一般在使用之前都要平衡至室溫。
◆ 每次檢測都會有推薦的孵育時間和溫度。冷凍的試劑一般需要更長的孵育時間。所以使用說明書上推薦的孵育溫度和時間。
我是否需要蓋板？
◆ 參看試劑盒內(nèi)說明書。如果說明書內(nèi)的實驗步驟中有推薦使用蓋板，則在使用時應(yīng)選用與酶標(biāo)板配套的蓋板，使邊緣與酶標(biāo)板緊密契合。如果蓋板的一邊突起，則會產(chǎn)生信號的差別。
酶標(biāo)儀的設(shè)置怎樣影響我的結(jié)果？
◆ 對于底物測定，如果讀數(shù)時間等于或超過2秒/孔，使從孔到*后一孔在讀書時存在時間上的延誤，會導(dǎo)致結(jié)果的異變。在底物反應(yīng)階段，辣根過氧化物酶會一直作用直到底物反應(yīng)*。而由于時間的延誤，底物越來越少，底物反應(yīng)也受到影響。將酶標(biāo)儀的讀數(shù)時間設(shè)定為1.0秒/孔。
我是否可以根據(jù)自己的方案來調(diào)整孵育時間？
◆ 更改孵育時間或溫度會導(dǎo)致檢測不能達到平衡或過度反應(yīng)。請按照說明書推薦的孵育時間和溫度操作。
◆ 如果同時進行多項檢測，對每孔必需分別計時已避免孵育不足或過度孵育。
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