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夏季實(shí)驗(yàn)室里的相關(guān)事宜介紹
閱讀：1188 發(fā)布時(shí)間：2019-7-24轉(zhuǎn)眼，已經(jīng)來到了七月底，在這個(gè)熱氣沖天的七月，用一個(gè)字形容它，是“熱”；用兩個(gè)字形容它，是“很熱”；用三個(gè)字形容它，是“非常熱”。在這個(gè)熱氣直逼的夏天，客戶遇到的一些常見問題。
問題一：天氣這么熱，ELISA試劑盒開封后剩余試劑應(yīng)該如何保存？
答：針對(duì)已開封的試劑盒，剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢，產(chǎn)品過期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
問題二：實(shí)驗(yàn)結(jié)果不顯色或顯色值低什么原因?
答:1.底物配制問題或底物已失效。
2.酶標(biāo)抗體中酶失活或效率低或漏加酶標(biāo)抗體。
3.抗原抗體不匹配。
4.稀釋度太高。
5.洗板次數(shù)過多，洗滌沖擊力太大等原因。
問題三：要驗(yàn)證某個(gè)細(xì)胞上有無該蛋白的存在，需要做免疫組化和western blot試驗(yàn)嗎？
答：免疫組化可以用來進(jìn)行定位，但是不能定量，而且有時(shí)會(huì)有假陽性，不易與背景區(qū)分；Western blot可以特異性檢測(cè)某個(gè)蛋白質(zhì)分子，進(jìn)行定量，但是不能定位。
問題四：抗原檢測(cè)出的分子量比資料上的大，是怎么回事？
答：1.抗原形成了二聚體。增多巰基乙醇量，煮沸變性時(shí)間延長，可以打開二聚體。
2.蛋白本身的修飾如：糖基化，磷酸化等
問題五：為什么我的細(xì)胞提取液中沒有目標(biāo)蛋白？
答：1. 你的細(xì)胞中不表達(dá)這種蛋白質(zhì)，換一種細(xì)胞。
2.你的細(xì)胞中的蛋白質(zhì)被降解掉了，你必需加入PMSF，抑制蛋白酶活性。
3.你的抗體不能識(shí)別目標(biāo)蛋白，多看看說明，看是否有問題。
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