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您知道顯色反應(yīng)避光對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)的重要性嗎?
閱讀：2335 發(fā)布時(shí)間：2018-10-17 秋之悠，是秋高氣爽、落葉飛舞;秋之雅，是清風(fēng)明月，海闊天空;秋之彩，是層林盡染、遍地金黃;秋之韻，是秋月融融，秋水盈盈。金秋十月，滬鼎生物祝您生活愉快!接下來(lái)，我公司為您揭曉顯色反應(yīng)避光對(duì)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的重要性，好消息千萬(wàn)不要錯(cuò)過(guò)哦。
這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性，顯色清晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA試劑盒中，正常人血清反應(yīng)后常可出現(xiàn)呈色的本底，此本底的深淺因ELISA試劑盒的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異，因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。
陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí)，更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。此時(shí)酶催化無(wú)色的底物有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無(wú)色，而陽(yáng)性孔則隨時(shí)間的延長(zhǎng)而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測(cè)定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。
ELISA試劑盒定性測(cè)定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯se情況適當(dāng)縮短或延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深，再延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，可使本底值增高。OPD底物液受光照會(huì)自行變色，顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
TMB受光照的影響不大，可在室溫中置于操作臺(tái)上，邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性，宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后ELISA試劑盒，約40分鐘顯色達(dá)，隨即逐漸減弱，ELISA試劑盒至2小時(shí)后即可*消退至無(wú)色。
TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長(zhǎng)時(shí)間不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長(zhǎng)測(cè)讀吸光值。
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2.特異：特異檢測(cè)目標(biāo)分子，結(jié)果可重復(fù)；
3.高度靈敏：可檢測(cè)到pg/mL級(jí)別的目標(biāo)；
4.種類齊全：可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬；
5.優(yōu)化設(shè)計(jì)：可拆卸式96孔板(12X8)，為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測(cè)進(jìn)行優(yōu)化。
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