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技術文章

ELISA技術參數之準確度/精密度

閱讀:1596          發布時間:2018-3-21

    ELISA試劑盒您經常會聽見它的好,但具體好在哪兒,您也不所得之!
一、ELISA試劑盒的準確度 
    通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對照試驗及干擾試驗的結果來分析判斷:
 1. 回收試驗 回收率越接近100%,準確率越高,一般以100%±5%為合格。
 2. 定值血清的測定 對于某些無法準確加入標準物的試劑盒,可用低、中、高濃度的定值血清進行測定,測得值符合定值血清的靶值范圍(±2S)為合格。
 3. 對照試驗 將被檢試劑盒與*的參考方法同時測定若干樣本(一般要求100份,zui少需30份),計算兩組結果的相關系數和直線回歸方程。
 4. 非特異性與干擾試驗 對維生素C、黃疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度,干擾值越小越好。

二、ELISA試劑盒精密度 
    試劑的瓶間差異、批內精密度和批間差異三組測定的平均值之間應無顯著差異,否則,試劑盒的均一性不符合要求:
1. 瓶間差異:同一試劑盒,取10瓶試劑復溶,測定同一樣品的含量,求平均值、標準差、變異系數。
2. 批內精密度:同一樣品用同一瓶試劑測定10次,求平均值、標準差、變異系數
3. 批間差異:同一樣品,用不同批號的10瓶試劑測定,求平均值、標準差、變異系數
三、線性范圍
    指該試劑盒按其說明使用時可準確測量的范圍。被檢樣品的含量超出測定線性范圍,必須改變樣品與試劑體積的比例,重新測定才能得到準確結果。試劑盒的測定線性范圍是衡量試劑盒質量的一個指標,也是正確使用該試劑盒的關鍵之一。
四、抗干擾作用:雙試劑型試劑盒主要優點是抗干擾作用。
五、靈敏度:在終點法靈敏度以特定波長下1cm光徑時單位濃度的吸光度值表示。
六、穩定性
·原包裝試劑的穩定性;
·復溶后試劑的穩定性;
·不同溫度下的保存期。

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