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伏馬毒素免疫親和柱的試驗原理及檢測步驟

閱讀:1906      發(fā)布時間:2020-3-17
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   伏馬毒素免疫親和柱適合于和HPLC或LC-MS結合使用,定量檢測FB1、FB2和FB3。適用于糧谷、飼料等樣本中的伏馬毒素凈化處理,提高了樣品的純度,純化后的提取液可用不同的分析方法測定
  伏馬毒素免疫親和柱適用范圍及性能:
  用于定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的伏馬毒素(FB)時的樣品前處理。
  伏馬毒素免疫親和柱的試驗原理:
  本產(chǎn)品凈化的基礎是抗原抗體反應,伏馬毒素單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上,樣品中的伏馬毒素經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢通過,在免疫親和柱內(nèi),伏馬毒素與抗體結合,洗滌液通過免疫親和柱除去未被結合的雜質(zhì)。后采用甲醇-乙酸洗脫伏馬毒素,然后進行相關分析。
  伏馬毒素免疫親和柱的檢測步驟
  l.樣品制備
  將固體樣品按四分法縮分至1kg,全部用谷物粉碎機磨碎并磨細至粒度小于1mm,混勻分成2份作為試樣,分別裝入潔凈的容器內(nèi),密封,標識后置于4℃下避光保存。玉米油樣品直接取2份作為試樣,分別裝入潔凈的容器內(nèi),密封,標識后置于4℃下避光保存。
  2.試樣提取
  準確稱取固體樣品5g(精確至0.01g)于50mL離心管中,加入20mL乙腈-水溶液(50+50),渦旋或振蕩提取20min,取出后,在4000r/min下離心5min,將上清液轉移至另一離心管中。玉米油樣品操作同固體樣品,提取液在下層。
  3.試樣凈化
  取2mL提取液,加入47mL吐溫-20/PBS溶液,混合均勻后過免疫親和柱,流速控制在1~3mL/min,用10mLPBS緩沖液淋洗免疫親和柱,分別用1mL甲醇-乙酸溶液(98+2)洗脫免疫親和柱三次,收集洗脫液,55℃下氮吹至干,加入1mL乙腈-水溶液(20+80)溶解殘渣。渦旋30s,過0.45um微孔濾膜后,收集于進樣瓶中,待測。
  以上便是今天關于伏馬毒素免疫親和柱的試驗原理及檢測步驟的全部分享了,希望對大家今后使用本設備能有幫助。
 

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