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技術文章

基于蒸發光散射檢測器技術檢測參松養心膠囊中的人參皂苷Rg1、Re

閱讀:1097          發布時間:2019-6-26

參松養心膠囊(測試物質:人參皂苷Rg1、人參皂苷Re  )

參松養心膠囊

Shensong Yangxin Jiaonang

本品由人參、麥冬、山茱萸、桑寄生、土鱉蟲、赤芍、黃連、 南五味子、龍骨等藥味經加工制成的膠囊劑。

【性狀】本品為硬膠囊,內容物為黃褐色至棕褐色的顆 粒和粉末;味苦。

【鑒別】(1)體壁碎片黃色或棕紅色,有圓形毛窩,直徑 8?24μm,可見長短不一的剛毛(土鱉蟲)。

(2)取本品內容物8g,置具塞錐形瓶中,加乙mi50ml,超 聲處理20分鐘,離心,上清液蒸干。殘渣用石油醚(30? 60°C)洗滌3次,每次15ml,棄去石油醚液。殘渣加無水乙醇-三氯甲烷(3: 2)混合溶液1ml使溶解,作為供試品溶液。另取山茱萸對照藥材0.5g,加乙酸乙酯10ml,超聲處理15分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加無水乙醇-三氯甲烷(3 : 2)混合溶液1ml使溶解,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則 0502)試驗,吸取上述兩種溶液各4μl,分別點于同一硅膠G 薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(12 : 2 : 0.5)為展開劑, 展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在110°C加熱至斑 點顯色清晰,在日光下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯一個相同顏色的主斑點。

(3)取本品內容物2g,加甲醇25ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml使溶解,加鹽酸調節pH值至1?2,用乙酸乙酯振搖提取2次,每次15ml,合并乙酸乙酯液,蒸干,殘渣加甲醇2ml使溶解作為供試品溶液。另取丹參對照藥材0. 5g,加甲醇5ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液作 為對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取上述兩種溶液各5μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸丁酯- 甲酸-水(3 : 1 : 1)上層液為展開劑,展開,取出,晾干,置氨蒸氣中熏10分鐘以上,至斑點顯色清晰,在日光下檢視。供試 品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯一個相同顏色的主斑點。

(4)取本品內容物4g,加甲醇30ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水25ml使溶解,用三氯甲烷振搖提取2次,每次25ml,棄去三氯甲烷液,水溶液用水飽和的正丁醇25ml振搖提取,分取正丁醇液,蒸干,殘渣加甲醇2ml 使溶解,作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品,加乙醇制成 每lml含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法 (通則0502)試驗,吸取上述兩種溶液各1μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-濃氨溶液 (8 : 1 : 3 : 1)的下層溶液為展開劑,展開,取出,晾干,噴以 5%香草醛硫酸溶液,在105X:加熱至斑點顯色清晰,在日光下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。

(5)取本品內容物1. 2g,加甲醇20ml,超聲處理10分鐘,濾過,濾液濃縮至約2ml,作為供試品溶液。另取黃連對照藥材50mg,加甲醇10ml,超聲處理10分鐘,濾過,濾液作為對 照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取上述兩種溶液各1μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水(6 : 3 : 1. 5 : 1. 5 : 0. 3)為展開劑,置氨蒸氣飽和的展開缸內,展開,取出,晾干,在紫外光(365mn)下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。

(6)取本品內容物4g,研細,加乙mi40ml,超聲處理20分鐘,靜置,取上清液,蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取五味子甲素對照品,加甲醇制成每1ml含1mg 的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗, 吸取供試品溶液2?4μl、對照品溶液1μl,分別點于同一硅膠 GF254薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯(9 : 1.2)為展開劑,展開,取出,晾干,在紫外光(254nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。

【檢查】應符合膠囊劑項下有關的各項規定。

【含量測定】人參  照液相色譜法測定。

色譜條件與系統適用性試驗  以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈為流動相A,以水為流動相B,按下表進行 梯度洗脫;蒸發光散射檢測器檢測(漂移管溫度:70度,氣體流速3l/min,氣體壓力:3.8bar)。理論板數按人參皂苷Re峰計算應不低于20000。

ELSD9000 蒸發光散射檢測器

時間(分鐘) 流動相A(%) 流動相B(%)

0?25 19 81

25?50 19→27 81→73

50?55 27→90 73→10

55?70 90 10

70?75 90→19 10→81

75?90 19 81

對照品溶液的制備  取人參皂苷Rg1對照品、人參皂苷Re對照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1ml各含0.2mg的 混合溶液,即得。

供試品溶液的制備  取本品30粒的內容物,精密稱定,混勻,研細,取約4g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加人甲 醇100ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率160W,頻率 40kHz)30分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密量取續濾液50ml,蒸干,殘渣加水30ml溶 解,用三氯甲烷振搖提取3次(30ml,20ml,20ml),棄去三氯甲烷液,水溶液用水飽和的正丁醇振搖提取5次(25ml,25ml,25ml,15ml,15ml),合并正丁醇液,用氨試液洗滌2次 (30ml,20ml),分取正丁醇液,再用正丁醇飽和的水洗滌2次 (30ml, 20ml),合并氨洗液和水洗液,用水飽和的正丁醇振搖提取3次(20ml,20ml, 15ml),合并正丁醇提取液,并與上述正丁醇液合并,蒸干,殘渣用甲醇溶解并轉移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續濾液,即得。

測定法  精密吸取對照品溶液6μl與9μl、供試品溶液15μl,注入液相色譜儀,測定,用外標兩點法對數方程計算,即得。

本品每粒含人參以人參皂苷Rg1(C42H72014)和人參皂 苷Re(C48H82O18)的總量計,不得少于0.15mg。

山茱萸  照髙效液相色譜法測定。

色譜條件與系統適用性試  驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液(3 : 9 : 88)為流動 相;檢測波長為238nm。理論板數按馬錢苷峰計算應不低于9000。

對照品溶液的制備  取馬錢苷對照品適量,精密稱定,加 50%甲醇制成每1ml含20μg的溶液,即得。

供試品溶液的制備  取裝量差異項下的本品內容物,研細,取約1g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇25ml, 密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHz)30分鐘, 放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過,精密 吸取續濾液10ml,加在中性氧化鋁柱(100?200目,7g,內徑 1.5cm,干法裝柱)上,用50%甲醇60ml洗脫,收集流出液和 洗脫液,蒸干,殘渣用50%甲醇溶解并轉移至25ml量瓶中,加50%甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續濾液,即得。

測定法  精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。

本品每粒含山茱萸以馬錢苷(C17H26 01(1)計,不得少于0. 32mg。

【功能與主治】益氣養陰,活血通絡,清心安神。用于治 療冠心病室性早搏屬氣陰兩虛,心絡瘀阻證,癥見心悸不安, 氣短乏力,動則加劇,胸部悶痛,失眠多夢,盜汗,神倦懶言。 

【用法與用量】口服。一次2?4粒,一日3次。

【注意】應注意配合原發性疾病的治療;個別患者服藥 期間可出現胃脹。

【規格】每粒裝0.4g 

【貯藏】密封。

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