高低溫試驗箱制冷劑可以稱為整個設備降溫的中間物質，它先接受制冷劑的冷量而降溫，然后再去冷卻其他的被冷卻物質，我們稱該中間物質為冷媒。又可稱載冷劑

高低溫試驗箱中制冷劑通過制冷機組的運轉，進人蒸發器內的制冷劑蒸發而吸熱，當通入蒸發器內冷水即很快在蒸發器內進行熱量交換，熱量被制冷劑吸收而溫度下降成為冷凍水，然后冷凍水再通過高低溫試驗箱設備中的表冷器與被處理的空氣進行熱交換，使試驗箱溫度降低。

通常高低溫試驗箱低溫溫度范圍不一樣，所采用的制冷劑也不一樣，-20、、-40度的采用美國杜邦R404環保制冷劑，-60、-70的設備采用復疊式制冷系統，-40以上采用R404制冷劑，-50--70度會啟動r23制冷劑降溫。